gene tranfection

목차

1. Topic
2. Purpose
3. Material
4. Method
5. Result
6. Discussion
7. Reference

본문내용

Solution 을 준비하여 100ul를 떠서 cell pellet과 잘 섞어준다.
5)의 세포부유액을 4)에서 준비한 DNA가 들어있는 tube에 넣고 섞어준 후 전체를 cuvette으로 옮기고 뚜껑을 덮는다. (tip 끝을 cuvette 모서리에 붙여서 세포부유액을 넣고 아래쪽에 공기가 차지 않도록 주의한다)
X 버튼을 눌러 전기충격을 주고 완료된 것을 확인하고 medium 1ml을 첨가한다. (2~4hr 경과 후에 새 medium으로 교체한다)
Transfection 후 20~24hr 경과 후 유세포분석기를 이용하여 GFP 발현을 확인한다.
25T flask에 있는 세포를 15ml tube에 따른다.
Centrifuge 한다. (1250rpm, 5min)
상층액을 버리고 cell pellet을 1xPBS 400ul로 suspension 한 후에 FACs tube에 옮긴다.

참고 자료

http://www.labplus.co.kr/tech/technote.asp notno=246
http://blog.naver.com/PostView.nhn blogId=seraph10471logNo=45480144
http://news.dongascience.com/PHP/NewsView.php kisaid=20020116200000000005classcode=0102
http://news.dongascience.com/PHP/NewsView.php kisaid=20120214200002278055classcode=01