TLR 표면분자발현조사

목차

1. Topic
2. Purpose
3. Material
4. Method
5. Result
6. Discussion
7. Reference

본문내용

1. 배양중인 세포를 15ml tube로 옮긴 후 centrifuge. (RT, 1250rpm, 5min
2. 상층액을 제거하고 1xPBS 10ml로 부유시킨 후 cell counting 한 후, centrifuge (조건동일)
3. 상층액 제거 후, 1x10^6 cells/ml 이 되도록 1xPBS로 부유시킨다.
4. 1.5ml tube 2개를 준비하여 각각 labeling (Con/ CD14-TLR5)
5. 3번 용액에서 1ml (1x10^6 cells)씩을 덜어 1.5ml tube에 분주하고 centrifuge
6. 상층액 제거 후, 항체혼합액 50ul씩을 각각의 tube에 처리하고 pipetting
7. Ice, 20min, Dark incubation
8. 1xPBS 150ul 첨가 → centrifuge
9. 상층액 제거 후 1xPBS 200ul pipetting suspension → centrifuge
10. FACS tube labeling

참고 자료

Regulation of CD14 expression during monocytic differentiation induced with 1 alpha,25dihydroxyvitamin D3 / DE Zhang, CJ Hetherington, DA Gonzalez, HM Chen and DG Tenen
Department of Medicine, Beth Israel Hospital, Boston, MA 02115.
BRIC