[토양미생물] 멸균 및 배지와 토양 미생물의 순수분리

목차

실험목적
실험원리
실험방법 및 재료
<실험방법>
결과 및 토의

본문내용

시료를 멸균증류수가 9ml 포함되어 있는 시험관에 희석하여 10-3 희석액을 만든다. 이 희석액 0.1ml를 Bennett's 배지에 도말, 28℃에서 7-14일간 배양한 후 순수분리를 한 다음 Bennett's agar 배지상에 다시 이식하여 28℃에서 7일간 배양후 상이한 방선균주를 선발한다.
① 배지와 기구들을 autoclave한후 배지를 붓고 말린다.
② 토양을 열처리한다.
③ 계열 희석을 한다. 열처린된 토양 1g을 99ml 멸균되 중류수에 녹인 다음 28℃에서 30분간 shaking하여 토양에 묻은 균들을 충분히 풀어준다. 이를 다시 9ml 증류수에 1ml을 희석하여 10-3 희석액을 제조한다.
④ 이들로부터 0.1ml을 plate에 옮기고 spreader을 이용하여 도말한다.
⑤ 희석액에서 멸균 피펫으로 0.1ml 채취한다.
⑥ 뚜껑을 열고 평판에 접종한다.
⑦ 95% 에탄올에 담겨둔 삼각유리봉을 불꽃으로 멸균한다.
⑧ 삼각 유리봉으로 분산 도말한다.
⑨ 뚜껑을 덮고 5분쯤 후에 뒤집는다.
⑩ 뒤집은 상태에서 배양기에 넣고 배양한다.
⑪ 도말 평판법을 통해 분리된 단일 콜로니를 다시 선상도말법으로 순수분리한다.
⑫ 배양균을 백금이로 떠서 평판배지의 한쪽에 도말하여 식균한다.
⑬ 백금이를 멸균하여 식힌 후 1차 접종부위를 2∼3회 거친 후 지그재글 2차 선상도말한다.
⑭ 평판배지를 뒤집어 배양한후 형성된 집락의 특성을 기록한다.

참고 자료

없음