보체활성 실험

목차

1. Introduction
2. materials
3. method
4. Result
5. Discussion
6. Reference

본문내용

1. Introduction
이번 실험은 RBC 표면에 존재하는 antigen을 인식하는 antibody와 complement를 이용하여 cell lysis가 어떠한 조건에서 일어나는지를 알아보는 실험이었다. 즉, 이번 실험을 통해 RBC가 lysis되기 위한 antibody와 complement의 상호관계는 어떠한지 그리고 각각은 열에 대해 어떠한 성질을 지니고 있는지를 확인할 수 있었다.

이번 실습에서 사용한 complement activation pathway는 classical pathway로 먼저 RBC 표면 antigen에 hemolysin이라는 antibody가 binding하고 이 antibody의 heavy chain에 complement 중 C1이 binding하게 되면 이후 serine protease인 C1r2s2가 C4를 분해하여 C4b로 활성화시키게 되고 이때 C4의 alpha chain에 존재하는 thioester 결합이 표면으로 드러나게 되며 이것이 RBC 표면의 R-OH기와 결합하게 되어 RBC 표면에 C4b가 부착한다. 그 후 C4b에 부착된 C2를 다시 C1r2s2가 분해하여 C2b로 활성화시키게 되고 이에 따라 C4b2b의 C3 convertase가 형성되게 되어 C3b가 형성된다. 이때 형성된 C3b는 C4b와 마찬가지로 thioester 결합이 표면으로 드러나 있어서 이것이 RBC 표면의 R-OH기와 결합할 수도 있고 또는 C3 convertase와 결합하여 C5 convertase가 될 수 있다. 이때 형성된 C5 convertase가 C5를 분해하면 C5b가 형성되고 이 C5b에 C6, C7, C8, C9가 결합하여 MAC(membrane attack complex)을 형성 membrane에 pore를 형성하여 RBC를 lysis시킨다.
한가지 의문점은 왜 이번 실습에서 alternative pathway가 일어나지 않는가이다. 분명 classical pathway가 일어날 때에도 C3가 필요하므로 분명 C3가 존재한다는 의미인데 왜 alternative pathway는 관여하지 않는지 잘 모르겠다.

참고 자료

Abul K. Abbas, Cellular and Molecular Immunology 7/ed., 2012, Elsevier.