Transformation 결과보고서

목차

1. 실험결과
2. 실험 내용 및 고찰
3. 참고자료

본문내용

1. 실험결과
1-1. transformation을 하고자 하는 목적
우리가 발현시키고자 하는 목적 DNA를 획득하여 vector에 재조합 시켜 clone을 만든다. 하지만 이 clone은 자기 스스로 목적 DNA를 발현 시킬 수 없다. 발현 시키기 위해서는 숙주세포가 필요하다. 그러므로 clone을 숙주세포로 도입시켜야 할 필요가 있는데 이 때 transformation을 사용한다. 이때 vector로는 plasmid를 사용한다.

1-2. 항생제 배지와 X-gal, IPTG를 사용하는 이유
Transformation이 일어나 plasmid가 bacteria 내부로 들어갔는지 육안상으로 확인 할 수 있는 방법이 없다. 그래서 고안한 것이 plasmid에 ampicillin resistance gene을 포함 시킴으로써 항생제 배지에서 plasmid의 유무를 확인 할 수 있다. Plasmid가 포함되지 않은 bacteria는 colony가 형성되지 않을 것이고, 포함되어 있는 것은 colony가 형성될 것이다.
하지만 비록 plasmid가 포함된 colony를 선별하였다 하더라도 그 plasmid가 외래 DNA를 포함하고 있는지의 여부는 알 수 없다. 그래서 사용하는 것이 Lac operon의 작동여부로 선별하는 방법이다. 여기서 X-gal과 IPTG가 사용되며, X-gal은 lactose 대신 color selection을 위한 것이고 IPTG는 LacZ 유전자가 전사될 수 있도록 해주는 inducer 역할을 한다.

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참고 자료

Michael T. Madigan, 오계헌 역, Brock의 미생물학, 12판, 바이오사이언스
이계준, 미생물공학, 2판, 라이프사이언스
네이버 블로그, http://blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=pow1987&logNo=52881957