세균배양과 세균 염색 및 현미경관찰

목차

1. 제목
2. 실험날짜
3. 재료 및 실험방법
4. 결과
5. 고찰

본문내용

1. 제목: 배지 만들기 및 세균배양과 세균 염색 및 현미경관찰

2. 실험날짜: 2013년 10월 28 ~ 11월 4일

3. 재료 및 실험방법
[실험1] 배지 만들기 및 세균배양
준비물: Nutrient Broth powder, Agar power, EMB(Eosin Methylene Blue) Agar powder, MSA(Mitis Salivarius Agar) powder, 증류수, 삼각플라스크, 미세저울, 호일, Autoclave Tape, Autoclave, petridish, 70% EtOH, 백금이, spreading tool, 마이크로 피펫, yellow tip, 면봉, 알코올램프, 각종세균(Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Streptococcus mutans)
광학현미경, 슬라이드글라스, Crystal Violet, Safranin, Iodine solution(착색제), 95% EtOH(탈색제), 3% KOH, oil, paper towel

실험방법
1. 3개의 삼각플라스크에 증류수와 각각의 배지 power를 적정량 조합하여 3가지의 배지(Nutrient broth(이하 Nutrient), Eosin Methylene Blue(이하 EMB), Mitis Salivarius(이하MSA))용액을 만든다.
Nutrient 배지: 600mL 증류수 + Nutrient Broth powder 4.8g + Agar power 9g
EMB 배지: 200mL 증류수 + Eosin Methylene Blue Agar powder 7.2g
MSA 배지: 200mL 증류수 + Mitis Salivarius Agar powder 18g
2. 고체 파우더가 없어질 때 까지 잘 흔들어 섞은 후, 호일로 입구를 감싸고 Autoclave Tape을 붙인 후 Autoclave에 넣고 121℃ 1.5kg/cm² 의 기압에서 20분간 멸균한다.
3. 20분 후 멸균한 배지를 petridish에 나눠 담는다. (Nutrient 4개, EMB 2개, MSA 2개)
4. 배지가 굳은 후 각 petridish의 뒷면에 접종할 세균의 명칭을 쓴 후 각각의 배지에 streaking법이나 spreading법을 써서 세균을 배지에 접종한다.
(배지에 따른 콜로니의 특성을 보기 위해 EMB 배지에는 E. coli를 MSA 배지에는 S. mutans를 하나씩은 접종하도록 한다.)

참고 자료

Lansuing. 2005. 『미생물학』 . (김경민, 역). 월드사이언스
Joanne M. Willey 외 3인. 2012. 『일반미생물학』 . (김영민 외 9인, 역). 라이프사이언스.
http://www.microbeworld.org/ - staphylococcus aureus자료
http://kchwoo9.blog.me/50133871778 - S. mutans 설명
http://delrio.dcccd.edu/jreynolds/microbiology/2421/lab_manual/atlas/biol2420photoatlas_ms.htm - MSA에서의 Streptococcus균의 특징