5. 건조배지 이용법

목차

1. Introduction
2. Materials & Methods
3. Result
4. Discussions

본문내용

(1) 실험 목적
건조필름배지를 이용하여 세균 및 진균류를 검사한다.
(2) 실험원리
본 실험에서는 가축분뇨 희석액을 시료로 하여 건조배지 중 일반세균(AC), 대장균(CC), 장내세균(EB), 황색포도상구균(STX), 효모&곰팡이(YM)를 각각의 선택 배지에서 검출하고 수를 센다. 세균의 생물량을 측정하는 방법은 여과 또는 원심분리된 균체의 건조중량을 측정하는 방법, 흡광도를 측정하는 방법, 고압액상질량분석기를 이용한 ATP측정, 세포벽성분의 측정, 광합성조류의 엽록소 및 광합성 색소의 양을 측정하는 방법, DNA 및 특정 단백질의 양을 측정하는 방법이 있다. 이 중 실험에서는 건조배지를 이용해 세균과 진균류의 수를 셌다. 세균 및 효모는 여과 또는 원심분리를 통하여 균체를 수집하고 수세하여 건조한 후 균체량을 측정할 수 있으나 통상 CFU 산정 또는 흡광도를 이용하여 증식정도를 파악한다. 곰팡이는 균사의 발육이 특징적이고 어느 시점에 자실체를 가지므로 개개의 세포를 헤아릴 수는 없고 발육시점을 정하여 발육한 균체를 여과하고 수세하여 건조한 후 량을 측정하여 생체량으로 표시한다. 하나의 집락 형성단위는 하나 이상의 세포를 나타낼 수도 있기 때문에 실험결과를 정확히 설명하기 위해서는 생균의 수보다는 집락형성단위 colony forming unit(CFU)의 수라고 표현한다.
건조배지를 이용한 방법은 상품화 되어진 제품을 주로 사용함으로써 배지 제작에 걸리는 시간을 절약할 수 있고 실험방법도 간단하다. 장기간 보관에 유리하며 배양공간을 작게 차지하는 장점이 있다.
세균과 진균류는 배지로부터 영양을 섭취하고 생장 분열을 반복하여 같은 장소에서 세균이 많아지면 육안으로 볼 수 있을 정도로 되는 군락을 만들기 때문에 이것을 계수하여 오염물질의 세균수 기준에 따라, 환경에 얼마나 영향을 미치는지 분석한다. 너무 많은 수의 생균을 접종하면 평판 위에서 몇몇 세포는 집락을 형성하지 못하거나 집락끼리 겹쳐서 오차가 많이 생길 수 있으므로 주의한다. 또 집락의 수가 너무 적으면 생균 측정의 통계학적 유의성이 낮아지기 때문에 적정수의 집락이 형성될 수 있도록 해야한다.

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