생과실6 DNA의추출

소개글

DNA 추출하는 원리에 대해서 조사했고 직접 실험을 통해 추출한 후, 전기영동으로 확인했다.

목차

1. 실험 이론
2. 실험재료와 방법
3. 실험결과
4. 고찰
5. 참고문헌

본문내용

1. 실험 이론

1) 플라스미드 DNA 추출법의 원리에 대해 조사
- 여러 가지 플라스미드 추출 방법 : plasmid를 추출하는 방법으로는 Boiling miniprep, Lithium miniprep 등 기본적으로 여러 가지가 있지만 그 가운데 대표적인 방법으로 alkaline lysis (denaturaion) method를 이용한다.

- Alkaline lysis : 높은 pH의 알카리성 anionic detergent음이온 계면활성제] 용액을 이용하여 대장균 세포를 용해시키고 플라스미드 DNA를 염색체 DNA와 구분하여 분리하는 실험법이다.

<중 략>

⑤ ③의 용액의 상층액을 500 정도(찌꺼기가 딸려오지 않을 정도) spin culumn에 넣고 12,000 rpm으로 30초간 원심분리한다.
⑥ 튜브에 내려온 용액은 버리고 WB용액 750를 넣고 12,000 rpm으로 30초간 원심분리한다.
⑦ 잔여액체를 제거하기 위해 다시 2분간 원심분리한다.
⑧ 1.5 tube로 갈아 끼우고 EB용액 20 넣고 1분간 기다린 후 12,000 rpm으로 1분간 원심분리한다.
⑨ 위 용액 10와 loading buffer 2을 섞은 후 아가로스 젤의 홈에 넣는다.
⑩ 전기영동 기계에 넣고 전기를 걸어준다. 전기영동이 끝나면 UV를 이용하여 DNA band의 위치를 확인한다.

참고 자료

http://2008.igem.org/Team:Heidelberg/Human_Practice/Open_Day
http://blog.naver.com/pow1987?Redirect=Log&logNo=51856451
http://blog.naver.com/nanohelix?Redirect=Log&logNo=70182013046
http://blog.naver.com/bsi1223?Redirect=Log&logNo=90098618701