PCR 기본 내용 강의안

목차

1. Back ground – DNA
2. Polymerase Chain Reaction (PCR)
3. Components of PCR
4. PCR process
5. PCR의 응용
6. 제한효소(Restriction enzyme)란
7. 전기영동(Eletrophoresis) 원리
8. 실험방법
9. 실험결과
10. 토론

본문내용

- 5 prime 방향 : phosphate (인산기) , 3 prime 방향 : sugar (당)

5’와 3’은 서로 반대 방향으로 위치하고 있음.

3’ 방향에 노출되어 있는 3’ OH기를 연결고리로하여 DNA polymerase가 다음 nucleotide를 붙여줌.
→ DNA 합성은 5’에서 3’으로의 방향성을 가짐.

- 1983년 Kary B. Mullis에 의해 고안.
- 세포 내에서 이루어지는 복제(replication) 과정을 시험관으로 옮긴 모델.
- 극소량의 유전자를 인위적으로 복제해 수십만 배로 증식시키는 기술.

<중 략>

(c) RT-PCR의 응용

- RT-PCR(reverse transcription-PCR)은 일반적으로 PCR의 template로 DNA를 쓰는 것과는 다르게 template로 mRNA를 쓴다. 이러한 점 때문에 주로 세포 내에서 mRNA가 얼마나 존재하는 가를 알아낼 때 사용된다. 이것이 중요한 이유는 세포 내에서 어떠한 유전자가 얼마나 발현되는 가는 주로 mRNA의 양과 관계가 있고, 따라서 이것을 측정하면 세포의 발현과 분화, 그리고 어느 상태(질병에 감염)에 있는지 까지 알 수 있다.
DNA와 mRNA의 농도(PCR product)는 band의 굵기를 보고 알 수 있다.

(d) PCR can be used to compare different genomes and cell

위에서 언급한 RADP PCR을 이용하면 서로 다른 organism 사이의 유사성을 비교할 수 있으며, RT-PCR이나 DDRT-PCR을 이용하면 cell에서 발현되는 유전자를 서로 비교할 수 있으며, 이는 질병 치료나 발생학에 많이 이용된다.
이외에도 식품에 서식하는 병원성 미생물의 검출, 추후 감염증이나 유전자 이상의 DNA진단에도 많이 사용된다.

참고 자료

없음