2. Mini Preparation

소개글

연세대학교 2013년도 2학기 공학생물2 결과레포트 A받은 자료입니다
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목차

1. Introduction.
2. Material.
3. Method.
4. Result.
5. Discussion.

본문내용

Introduction.

유전자 재조합은 DNA를 목적에 맞게 제한효소와 리가아제를 이용해 적절히 자르고 붙여서 유전물질을 원하는 형태로 개조시키는 과정이다. 이렇게 반응시킨 DNA용액을 대장균에 형질전환 시킨다. 이 때 원하는 DNA분자가 만들어졌는지를 조사하기 위하여 형질전환체 중 여러 colony를 후보로서 택하여 형질전환체 내에 들어있는 plasmid DNA를 조사해야한다. 이 때 preparation(of plasmid DNA) 방법은 많은 후보를 빠른 시간에 분석하는데 유용하게 사용된다.
주로 minipreparation(mini prep.)라고 부르는 이 방법은 plasmid DNA를 소량 분리하는 방법이다. 기본적인 원리는 세균의 cell wall과 cell membrane을 부수고 DNA만을 분리하는 것이다. 이 때 중요한 것은 세균이 원래 가지고 있는 chromosomal DNA와 plasmid DNA를 구분하여 분리하는 것이다. 이 두 가지는 모두 DNA이므로 성질이 비슷해 구분하여 분리하기가 어렵다. 그러나 chromosomal DNA는 분리과정에서 linear형태가 되고 크기가 커서 원심분리를 통해 대부분 침전의 형태로 제거 할 수 있다. 이 방법으로 소량의 plasmid DNA를 얻을 수 있다.

참고 자료

없음