생물화학공학실험 PCR

목차

1. Abstract
2. Experiment
3. Result
4. Discussion

본문내용

1. Abstract
이번 실험은 PCR법을 통하여 DNA를 증폭시켜 전기영동으로 확인하는 실험이었다. PCR이란 중합효소연쇄반응으로, DNA의 짧은 부위가 DNA 중합효소에 의해 여러 번 복제되는 것을 말한다. DNA를 증폭시키기 위해서 PCR mixture를 제조하고, PCR 조성이 완성되면 PCR Machine을 이용하여 DNA를 증폭시킨다. 증폭된 DNA는 전기영동법을 이용하여 눈으로 확인한다.

<중 략>

2) 실험방법
(1) PCR mixture를 제조한 뒤 PCR thermocycler의 온도를 설정한다.
(2) 마지막 단계 68℃ 5min으로 설정한다.
(3) 전기영동기기에 Agarose gel을 넣고 0.5ⅹTAE buffer를 잠길 때까지 채운다.
(4) Agarose gel의 첫 번째 홈에 DNA ladder 2μl를 loading한다.
(5) loading star (6X) 2μl를 새로운 PCR tube에 넣고 10μl PCR product와 섞은 뒤 두번째 홈에 loading한다.
(6) 25분 동안 전기영동을 한다.
(7) Agarose gel을 꺼내 UV transilluminator위에 놓고 자외선을 쬐어 DNA농도를 확인한다.

<중 략>

4. Discussion
이번실험 PCR은 miniprep을 통하여 추출했었던 Plasmid DNA를 대량으로 복제를 하는 실험이었다. PCR machine으로 진행하는 순조로운 실험이었기 때문에, 이론위주로 설명하겠다.
PCR이란 것은 핵산증폭 반응으로 DNA중합효소를 이용하여 특정 표적 유전물질을 대량으로 증폭할 수 있는 방법이다. PCR은 열변성과정, 결합반응, 중합반응 이 3단계를 거친다.또한 증폭될 DNA는 A,T,G,C 총 4개의 염기로 구성되어 있으며 상호보완적이다.

참고 자료

없음