[생화학실험] 형질전환된 재조합 대장균의 선별,유전자클로닝의 전체과정 재검증

목차

1. 실험 날짜
2. 실험 제목 및 목적
3. 개요 – 이론 및 실험 원리
4. 실험재료 및 방법
5. 실험결과
6. 고찰
7. 참고문헌

본문내용

1. 형질전환 된 재조합 DNA의 선별
- 형질전환을 선별하는 방법에는 여러가지 방법이 있다. 흔히 쓰이는 방법으로는 항체저항성이나 영양요구를 사용하는 방법이 있다. 그리고 복제기술에서 선별을 할때에는 β-galactosidase를 암호화하는 lacZ유전자를 사용하는 blue white screen의 방법이 쓰인다. 또 다른것으로 흔히 쓰이는 방법은 녹색형광단백질(GFP)을 사용하는 방법이 있다.
- 블루 화이트 스크린(Blue white screen)은 스크리닝 기술로 벡터의 성공적인 DNA접합을 검출하는 기술이다. 관심있는 DNA가 벡터에 들어가면 벡터는 형질전환되어competent cell에 들어간다. 수용성세포들은 X-gal이 있는 평판에서 자라난다. 만약 접합이 성공적이라면, 박테리아 콜로니는 흰색이 될 것이고, 성공적이지 않다면, 파란색이 될 것이다. 이 기술은 DNA접합을 검출하는데 있어서 빠르고 쉬운 기술이다.

참고 자료

http://blog.naver.com/withcoffee67?Redirect=Log&logNo=70160635571
http://blog.naver.com/nanohelix?Redirect=Log&logNo=70180385720
http://blog.naver.com/bsi1223?Redirect=Log&logNo=90098618701
https://www.neb.com/tools-and-resources/troubleshooting-guides/troubleshooting-guide-for-cloning