SIMPLE STAINING & 박테리아 배양실험
- 최초 등록일
- 2014.09.03
- 최종 저작일
- 2013.09
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목차
1. Method
2. RESULT
3. DISCUSSION
4. STUDY SUMMURY
5. REFERENCE
본문내용
a) Side glass 3개에 Staphylococcus aureus, Escherichia coli, and Bacillus subtilis 를 loop을 사용해서 넓게 도말 한다.
b) Fixation 시키기 위해서 알코올 램프에 1-2회 고정시킨 후에 5분 이상 공기 중에 건조시킨다.
c) E.coli +Safranin, S. aureus + Crystal Violet, B. subtilis + Methylen blue의 염색 약을 3개의 슬라이드 위에 각각 떨어트리고 1분간 염색한다.
d) 슬라이드 뒷면에 흐르는 물에 씻어 염색약이 완전히 씻겨 내려가도록 한다.
<중 략>
우리조(9조)에서는 현미경으로 각 균주를 관찰하는 것이 비교적 수월하게 진행되었지만 몇몇 조에서 관찰하기에 어려움을 느꼈는데 그 이유에 대해서 생각해보았다. 먼저 STAINING은 모두 충분히 염색을 시행하였고 washing 역시 제대로 수행되었다고 생각하기에 slide에 sampling할 때 가장 큰 문제가 있었을 것이라 생각한다.
1) method의 가장 첫 단계인 loop을 사용해서 넓게 도말하는 과정에서 smear 전의 sample의 균주 농도가 높았기 때문에 도말 과정이 제대로 이루어져 있지 않았다면 균주의 농도가 특정 부분에서 높아서 뭉쳐져 관찰될 가능성을 배제할 수 없을 것이다.
<중 략>
Gram negative bacteria와 lactose fermentation 균주를 감별할 때 이용한다. 그람 양성 세균의 증식을 억제하는 bile salt, crystal violet dye와 lactose fermentation 균의 지시약인 neutral red dye 그리고 lactose와 peptone을 함유하고 있다. Lactose를 감별하는 지시약이 있어 E.coli,Enterobacter, Klebsiella와 같은 lactose를 분해하는 균은 pH가 6.8이하가 되어 red/pink색을 나타내고 Salmonella, Shigella, Proteus균은 Lactose를 사용하지 못하고 Peptone을 이용하여 증식하므로 색의 변화가 없이 colony로 증식한다.
참고 자료
http://academic.pgcc.edu/~kroberts/Lecture/Chapter%206/culture.html
http://scienceblogs.com/mikethemadbiologist/2009/07/13/a-significant-but-simple-medic/