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Immunohistochemistry-면역조직화학법

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최초 등록일
2014.11.18
최종 저작일
2014.02
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목차

1. 실험제목
2. 실험날짜
3. 실험 목적
4. 실험 준비물
5. 실험 방법
6. 실험 내용 및 결과
7. 토의

본문내용

- 실험 목적
◆ 항원-항체반응을 통해 내가 원하는 단백질이 어느 세포에서 나오는지, 어느 정도 얼마큼 나오는지 알아 볼 수 있다.
◆ 타깃치료제(기초연구)

- 실험 준비물
Mouse brain, PBS(Phosphate-buffered saline) solution, triangular flask, 트랜스퍼피펫, 피펫, Slide glass, Cover glass, microscope, tube, Well plate, Hydrogen peroxide, Normal goat serum, NeuN antibody, GFAP antibody, CD11b antibody, DAB(diaminobenzidine)

- 실험 방법
◆ Immunohistochemistry ◆
- Day 1
➀ cut mouse brain section 40μm.
➁ PBS(0.01Mph7.4)solution making.
: - 0.01M Monobasic sln 500mL + 0.9% Nacl
156.01*0.01*0.5=0.78g+4.5g(Nacl)
- 0.01M Dibasic sln 1L + 0.9% Nacl
141.96*0.01*1=1.4196g+98g(Nacl)
➂ PBS washing for 5 min, 1 time.
➃ Quenching with 0.3% Hydrogen peroxide for 15 min.
- Quenching: H2O2→O2 (세포 안에 있는 peroxidase 활성을 제거)
:4.95mL PBS + 50μL H2O2
➄ PBS washing for 5 min, 3 times.
➅ Normal Serum blocking with 5% norma goat serum for 1hr.
:1well 당 300μL씩 , 950μL PBS + 50μL NGS

참고 자료

없음
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