transformation

목차

1. Subject
2. Introduction
3. Material &　Methods
4. Results
5. Discussion
6. Reference

본문내용

1. Subject : Transformation
transformation에 대한 개념을 학습하고, 실제로 Bacterial cell을 이용하여 transformation을 해본뒤, Colony Forming Unit을 구하여 구해보자.

2 .Introduction
1) 형질전환(Transformation)
① E. coli는 linear 또는 circular DNA를 받아들일 수 있다. 이러한 과정을 transformation이라 한다.
② 과정&원리
ⓐ E. coli cell이 DNA를 uptake할 수 있는 상태 (competent)로 만들어 주기 위해 E. coli cell을 Ca++ 과 같은 multivalent ion의 존재하에 0℃에서 incubation한다.
- 이때 cation은 E. coli cell membrane에 존재하는 lipid의 negatively charged phosphate와 complex를 이룰 것으로 추정된다.
- 낮은 온도는 cell membrane을 응고시켜 charged phosphate의 분포를 안정화하여 cation에 의하여 효과적으로 shield되게 하여준다.
ⓑ 37~42℃로 heat shock를 가하면 E. coli membrane 내외의 thermal imbalance가 생겨 DNA가 세포 안으로 빨려 들어가게 된다.
- 이외에 electroporation에 의한 transformation으로 electric charge를 E. coli cell에 순간적으로 가하여 이때 생긴 pore를 통해 DNA를 세포 안으로 넣는 방법이 있다.

참고 자료

Rodney boyer. (2007). Concepts in Biochemistry. 3th. p389-p395
http://www.genehunters.co.kr/Training/01_2_1.htm