DNA 정량 생화학 실험

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실험목적
DNA 기본구조에 대해 익히고 분광광도계를 이용해 흡광도를 측정하여 DNA농도와 순도를 산출해본다.

실험 이론
DNA 구조
DNA 농도측정 원리
DNA 정량법

DNA 구조
5탄당 데옥시리보오스에 염기, 인산이 결합한 뉴클레오티드를
단량체로 갖는 중합체
3‘탄소에 다른 뉴클레오티드의 인산이 포스포디에스테르 결합을 함으로써 DNA단일사슬형성
당-인산등뼈에 4종류 염기가 무작위로 결합한 구조

DNA 이중나선
피리미딘과 퓨린은 수소결합을 통해 상보적으로 결합 G-C(수소3중결합) T-A(수소2중결합)

1. DNA 농도측정의 원리
핵산, 뉴클레오티드 및 뉴클레오시드 등은 자외선(260㎚)을 강하게 흡수
퓨린 및 피리미딘 염기의 공명구조 때문
개개의 염기들은 각기 특성적인 자외선 흡수 스펙트럼을 가진다.
핵산의 총흡광도는 핵산을 구성하는 염기들의 총흡광도의 합과 같으므로 260㎚에서의 흡광도를 측정하여 DNA 농도를 산출할 수 있다.

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