Immunohistochemistry 실험보고서에 참고할수 있는 보고서입니다

소개글

Immunohistochemistry의 method와 실험을 이해하는데 도움이 되는 문제들과 그에대한 답으로 구성되어있습니다.

목차

1. Immunohistochemistry의 method
2. Cryopreservation이란 무엇이며 어떤 방법이 쓰이는가?
3. Transverse section이란 어떤 방법으로 배아를 절편하는 것을 의미하는가? 그밖에 어떤 절편 방법이 있는가?
4. Tuj1유전자 두 copy(diploid)이므로 중 하나에 결손이 일어나 하나의 allele에서만 transcription이 일어난다고 (즉 mRNA가 만들어진다고) 가정하자. 만약 이러한 상황임에도 불구하고 단백질의 양은 같다면 어떻게 설명하겠는가?

Reference

본문내용

Methods
1. 조직 4개가 붙어있는 슬라이드 주변에 붙어있을 수 있는 먼지나 물풀같은 texture를 닦아내기 위해 PBS 200람다로 wash한다.
2. permeabilizing & blocking solution(->하는일 찾아보기)200람다 add하여 antibody가 잘 붙게 해준다.
3. primary antibody(Tuj1)를 400람다 붙인 다음 상온에서 40분 동안 incubation한다.
4. PBS로 3분씩 3번 반복해서 wash해준다.
5. 빨간색 빛을 내는 형광물질이 달려있는 secondary antibody(anti-mouse Alexa 594)를 붙인 다음 상온에서 30분 동안 incubation한다.
6. PBS로 3분씩 3번 반복해서 wash해준다.
7. DAPI 200람다로 stain한다음 10분 동안 incubation한다.
8. PBS로 3분씩 3번 반복해서 wash해준다.
9. 현미경관찰을 하는 동안 조직을 보호하고 오래 보관할 수 있도록 cover glass를 덮어주는 작업인 mounting을 해준다.
10. 현미경으로 관찰 한다.

참고 자료

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/10381
사람발생학, 2004.12, 고문사, 고정식
간추린 발생학, 박경한, E public, 2006.1.3