5주차 PCR

목차

1. Title
2. Introduction
3. Material & Methods
4. Result
5. Discussion
6. Reference

본문내용

1. Title: PCR(polymerase chain reaction)

2. Introduction
Polymerase chain reaction(PCR) technique은 1980년대 중반 K. Mullis에 의해서 고안된 기술이다. 이 PCR techinique은 유전자를 연구, 분석하는 분자유전학에 혁신을 일으켰다. 유전자를 분석하고 연구하는데 있어서 가장 큰 문제점은 복잡한 전체 genome중에 연구하고자 하는 유전자가 희귀하다는 것인데, PCR은 특정 DNA Sequence의 copy수를 기하급수적으로 증폭시킬 수 있다.
PCR은 DNA polymerase에 의한 DNA 복제의 특징을 이용한다. DNA polymerase가 외가닥 DNA를 주형으로 해서 상보적인 DNA를 합성한다. 이러한 외가닥 DNA는 두가닥 DNA를 끓임(denature, 변성)으로써 간단하게 얻을 수 있다. DNA polymerase가 DNA합성을 시작하게 위해서는 시작부위가 두가닥 DNA로 되어 있어야한다. 따라서, 증폭시킬 DNA sequence의 양 끝에 상보적으로 결합할 수 있는 작은 DNA조각(oligonucleotide primer)을 함께 넣어주면 이 primer가 특정 DNA sequence의 양 끝에 가서 결합(anneal)해 DNA polymerase가 DNA 합성을 시작할 수 있도록 해준다. 일단 primer가 결합한후에는 DNA polymerase의 작용으로 DNA 합성이 반대편 끝까지 진행(extend)된다. 이렇게 1)denature, 2)anneal, 3)extend가 한 cycle이 된다. 다음 cycle에서 original DNA와 새로 합성된 DNA가 분리되어 외가닥 DNA 주형이 된다. 따라서, n cycles 후에, 이론적으로 2n의 두가닥 DNA가 존재하게 된다.

참고 자료

http://en.wikipedia.org/wiki/Polymerase_chain_reaction#PCR_principles_and_procedure
http://en.wikipedia.org/wiki/DNA_polymerase
http://en.wikipedia.org/wiki/Polymerase_chain_reaction#PCR_principles_and_procedure
http://health.naver.com/medical/testAndTreat/detail.nhn?checkupTreatmentMethodCode=BA000092&checkupTreatmentMethodTypeCode=BA&selectedTab=detail#co
http://ko.wikipedia.org/wiki/%EC%8B%A4%EC%8B%9C%EA%B0%84_%EC%A4%91%ED%95%A9%ED%9A%A8%EC%86%8C%EC%97%B0%EC%87%84%EB%B0%98%EC%9D%91
http://www.google.co.kr/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=web&cd=9&ved=0CGcQFjAI&url=http%3A%2F%2Fbric.postech.ac.kr%2Fmyboard%2Fdown.php%3FBoard%3Dexp_qna%26filename%3D35_h_1.pdf%26id%3D218847%26fidx%3D1&ei=Rn1tUt7KJoa4rAf2v4CoCQ&usg=AFQjCNHI6ajjFDCy_REdmFVK3JeLiA-PRQ&bvm=bv.55123115,d.bmk&cad=rjt
Biology (9th edition), Campbell, Reece