[A+ 실험보고서 결과사진포함] DNA methylation analysis

목차

1. 실험소개 & 목적
2. 실험방법
3. 실험결과
4. 고찰

본문내용

실험목표: MSP-PCR과 metylight 이용하여 target 유전자의 metylation을 분석하고 gDNA bisulfite modification의 원리와 다양한 DNA metylation 연구에 대하여 알아보자.DNA methylation analysis: 특정 유전자의 DNA methylation의 패턴을 분석하는 실험.포유류동물의 genomic DNA 상의 대략 3-5%의 cytosine이 methylation 되어있고, 그중에 대략 70%가 CpG dinucleotide상에 존재한다. 이들 CpG가 모여있는 CpG island는 유전자의 발현을 조절하는 promotor부위에서 많이 발견되며, 이들의 methylation 패턴(Hypo- or hyper methylation)에 따라서 그 유전자의 발현양상이 조절할 수 있다. bisulfite conversion: Sodium bisulfite를 DNA에 처리하게되면, DNA 상의unmethylated cytosine(C)염기는 deamination되어 Uracil(U)염기로 바뀌어버리는 반면, methylated cytosine(C)는 그대로 cytosine(C)로 남아있게 된다. 즉, cytosine의 methylation 유무에 따라 서로 구별할 수 있도록 다른 염기로 표지하는 것이다. ①MSP method: PCR 이용. Primer을 사용하여 methylation 부분을 증폭하고 전기영동으로 결과를 분석할 수 있다. ②methylight method: taqman probe을 사용하여 real-time PCR(quantitative PCR)로 methylation 분석

<중 략>

Unmethylation과 methylation이 쉽게 구분이 가도록 결과 값이 잘 나온거 같다. Marker를 기준으로 앞부분은unmethylation과 methylation을 번갈아 loading했는데 band를 통하여 구분할 수 있다.

참고 자료

없음