서울대학교 [면역학 실습] Cell Proliferation Assay

소개글

Jurkat cell에 가해준 ConA의 농도를 다르게해서 각 농도에 따라 Jurkat cell이 얼마나 잘 proliferate하는지 비교해 본 실험 레포트인데, 특히 Protocol에서 계산법이 잘 나와있습니다.

목차

1. 배경
2. Protocol
3. Result
4. Discussion
참고문헌

본문내용

1. 배경
■ JURKAT cell : 사람의 급성림프아구성 백혈병환자 말초혈유래 T세포주인데, Interleukin 2 (IL-2) 생산세포로서 알려져 있다. 이 세포주로부터 IL-2 mRNA를 추출하면 IL-2 cDNA를 복제할 수 있었다. 일반적으로 lectin, PMA와 CD3항체의 자극으로 IL-2 및 인터페론γ(IFN-γ)를 생산하는 변이주도 있다. 또 표면표지는 CD4＋이지만 그의 발현이 높은 클론과 낮은 클론이 있다. 이것은 T세포 활성화 기구의 연구에 많이 이용하고 있다.
■ Mitogen : 세포막 표면의 특정화학구조기(막수용기)와 결합해서 그에 의해서 그 세포의 DNA합성과 세포분열을 일으키는 물질을 mitogen(분열인자)이라고 한다. mitogen은 특히 lymphocyte에 대해서 작용한다. 어느 종의 식물에서 얻어지는 물질(PHA, Con–A, PWM등)이나 세균에서 얻어지는 LPS등이 있다.
■ Concanavalin A : ConA로 약기한다. Canavalia ensiformis 내에 있는 α-D-mannose 잔기와 α-D-glucose 잔기에 친화성이 있는 lecton. 결합에는 α-D-mannose잔기, α-D-glucose잔기의 3.4.6위에 OH가 중요하다. 특히 Manα1→3 (Manα1→6)Man의 3당과 강한 친화성이 있고 당단백질과의 상호작용에서는 이 3당구조를 포함한 아스파라긴결합형 당사슬과 결합한다. 중성 근처에서는 4합체(분자량 104,000)구조를 하며, 산성(pH 5 이하)에서는 2합체구조를 한다. 각 소단위에 당은 포함되지 않으나 Mn＋와 Ca2＋가 각 1개씩 포함된다. 이들 이온은 고차구조의 유지, 당결합성에 관계한다. 토끼, 모르모트, 래트, 생쥐 등의 적혈구는 강하게 응집하지만 사람이나 소의 적혈구는 응집하지 않는 특징이 있다. 또 T세포 분열촉진제로서의 작용이 있고 T세포의 증식을 촉진하는 동시에 IL2 등 각종 리포카인 생산을 촉진한다

참고 자료

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[네이버 지식백과] 콘칸나발린A(콘카나발린A) [concanavalin A] (생명과학대사전, 초판 2008, 개정판 2014, 도서출판 여초)http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=431672&cid=42411&categoryId=42411