유전자 증폭 기술의 기본 원리와 고찰

목차

Ⅰ. PCR 이란 ?

Ⅱ. Step-by-step reaction during PCR
1. Pre-PCR status
2. Denaturation
3. Annealing
4. Extension

Ⅲ. Taq polymerase

Ⅳ. Competitors of Taq

Ⅴ. Components of PCR
1. Water
2. Buffer
3. Templates preparation methods
4. dNTPs
5. Primer set
6. MgCl2
7. Taq polymerase

본문내용

Ⅰ. PCR 이란 ?
분자생물학은 그 연구방법의 특성상 실험이 아주 중요한 부분을 차지하고 있다. 즉 분자생물학의 발전은 실험방법의 발달을 그 전제로 하고 있다고 할 수 있을 것이다. 그 동안 여러 획기적인 실험방법들의 개발로 과거 불가능했던 연구를 가능하게 해 주었고 그 결과 분자생물학이라는 새로운 학문이 탄생하게 된 것이다. 현재 여러 분야의 생물학 연구에서 분자생물학(molecular biology)이라는 도구 없이 실험을 한다는 것은 상상하기도 힘들 것이다. 그 도구들 중 가장 중요한 것이 현재 각광을 받고 있는 PCR이라는 것에는 누구도 이견이 없을 것이다. 과거에는 박물관 시료, 건조 시료, 범죄 현장에서의 여러 증거물 그리고 화석 등과 같은 경우 DNA분리는 가능했지만 양이 너무 적거나 DNA가 너무 오래되어 연구에 사용할 수 없었다. 그러나 1983년 4월, Cetus 회사에서 일하던 화학자 Kary Mullis에 의해 PCR (Polymerase Chain Reaction)이 고안되면서 DNA의 양이나 질에 관계없이 증폭이 가능하게 되었다.

<중 략>

원래 PCR에 사용되었던 polymerase는 E.coli의 DNA polymeraseⅠ인 Klneow fragment 이었는데 이는 DNA를 single strand로 풀기 위해 온도를 올리면 파괴가 되어버리기 때문에 매 cycle 마다 enzyme 넣어주어야 하는 불편함이 있었다. 그러나 이러한 문제를 해결한 것은 Dr. Saiki이며, 그가 발견한 Thermus aquaticus 라는 온천에 사는 미생물에서 추출한 polymerase를 DNA polymeraseⅠ 대신에 사용하였다. Taq. polymerase의 사용으로 PCR은 sensitivity, specificity, yeild, fridelity등 모든 면에서 월등한 향상을 가져올 수 있었고 그 응용범위를 무한대로 넓혀가기 시작했다.
taq.polymerase는 1993년 science 지에 의해 The molecule of the Year 로 선정되었다.

참고 자료

없음