단백질 정량법

목차

I.Introduction

IV.Result
1. BSA standard curve
2. Sample Preparation
3. standard curve를 이용한 sample 추출물 1ml당 함유된 단백질의 양
4. Sample 1개 당 함유된 단백질의 양

V.Discussion

본문내용

● 단백질 정량법

○ Biuret test
두개 이상의 펩티드 결합을 가지고 있는 화합물들은 알칼리성 용액에서 묽은 황산구리로 처리하면 자주색을 띠는 물질을 생성한다.
색깔은 구리원자와 두 개의 펩티드 사슬에서 오는 네 개의 질소원자들 사이에서 배위화합물이 형성됨으로써 생기는 것으로 생각되고 있다.
뷰렛 시험은 모든 단백질에 대해서 재현성이 꽤 좋으나 비교적 많은 양(1내지 20mg)의 단백질을 정량하는 데 쓰이는 방법이다.
Biuret method는 알칼리 조건하에서 구리(Cu2+)ion이 단백질의 peptide nitrogen과 peptide에 결합하여, 보라색의 착화합물을 생성하고 540-560nm에 서 흡광을 나타내는 것을 이용하여 단백질을 정량하는 방법이다.
두 개 이상의 펩티드 결합을 가진 화합물도 마찬가지로 유사한 착화합물을 만들며 단백질의 경우에는 청자색 또는 적자색을 나타낸다.
이 반응은 구리가 peptide에 결합하므로 단백질의 amino acid 의 조성과는 관계없이 일정하나 단백질의 양이 1-6mg/ml 정도가 있어야하기 때문에 sensitivity가 매우 낮다는 단점이 있다.

참고 자료

김창한, 식품분석, 1996, 고문사,
조덕재, 식품분석, 2002, 주문화사,