[분자생물학] DNA prep

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이번 실험은 plasmid DNA preparation 이었다. 이는 Plasmid 한 세포에서 다른 세포로 옮겨갈 수 있는 성질을 지니고 있으므로 유전자를 옮기는 운반자 혹은 vector로 작용을 한다는 성질을 이용하고자 하는 것이다. 즉 외부에서 연구하고자 하는 DNA 조각을 plasmid에 삽입하여 연결시킨 후 박테리아에 넣어 주면 이 형질전환 된 세포내에서 DNA는 독자적으로 복제되므로 DNA 조각을 cloning하는 vector로 이용하기 위해 먼저 이 실험을 하였다.
먼저 16H, 37℃에서 180rpm으로 배양한 E.coli를 Eppendorf tube에 1ml로 담은 후 12000rpm(R.T)으로 2분간 원심분리 했다. 그리고 상층액을 제거하는데, 우리가 얻고자 하는 물질이 아닌 이물질을 확실히 제거하기 위해서는 세포가 침전한 위의 상층액을 잘 제거해야 한다. 그러기 위해서 원심분리를 한 번 더 돌려 순도를 높이도록 한다.

참고 자료

분자생물학회, 분자생물학, 아카데미서적, 1997
심웅섭, 분자생물학, 월드사이언스, 1999
한국생물공학회, 생물공학 실험서, 자유아카데미, 2000
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_molecular/