ELISA에 관해서(울산대 A+ Report)

목차

없음

본문내용

<TITLE>
-ELISA로 cytokine secretion 확인

<Purpose>
-ELISA의 기능 및 각 종류에 대한 이해와 WB와 ELISA의 차이점에 대한 이해

<Introduction>
*ELISA=효소 결합 면역 흡착 분석법
-(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)
- sample에서 antibody나 antigen의 존재를 찾는데 사용되는 생화학적 방법.
-antigen-antibody 반응을 enzyme 표지를 이용하여 enzyme에 대한 substrate를 첨가하여 antigen-antibody 결합체에 붙은 enzyme의 양을 enzyme이 substrate에 대해 작용하여 발색반응이 일어난 정도를 분광 광도계로 측정함으로써 정량하는 방법

<중 략>

(1) Direct ELISA
-Antigen과 Enzyme conjugation된 antibody가 직접 binding하여 target을 검출하는 방법
-Antibody는 1개만 사용이 되며,detection을 위해 이 antibody에는 HRP(horseradish peroxidase)나 AP(alkaline phosphatase)등의 효소가 접합되어 있는 특징이 있음

(1) Direct ELISA
-Antigen과 Enzyme conjugation된 antibody가 직접 binding하여 target을 검출하는 방법
-Antibody는 1개만 사용이 되며,detection을 위해 이 antibody에는 HRP(horseradish peroxidase)나 AP(alkaline phosphatase)등의 효소가 접합되어 있는 특징이 있음

<그 림>

(2) Indirect ELISA
-Antigen과 detection을 위한 antibody가 직접 결합하지 않는 특징이 있음
-Antigen은 plate에 고정하게 되며,antigen specific antibody(primary antibody)가 결합하게 됨
-이후,Enzyme이 conjugation 되어 antibody(seconday antibody)를 binding하여 검출하게 되며
Indirect ELISA에 사용되는 seconday antibody에는 HPP

참고 자료

실험생화학, 한국생화학회저, 개정 3판, 탐구당, 1999년 p. 411-412
http://en.wikipedia.org/wiki/ELISA
Methods in Molecular Biology vol.1318 ELISA Methods and Protocols