콜로니 PCR 예비 및 결과보고서

목차

1. 실험 제목
2. 실험 날짜
3. 공동 실험자
4. 실험 목적
5. 원리
6. 실험 기구 및 시약
7. 실험 방법
8. 고찰

본문내용

◆ 콜로니 PCR
원하는 유전자를 vector에 삽입하여 플라스미드를 만든 다음 원하는 유전자가 잘 들어갔는지 확인하기 위하여 고체 항생제 배지에 키운다. 콜로니가 형성되면 이것을 PCR을 이용해 증폭시킨다.
LB 배지에 아가를 넣으면 고체 배지가 된다. 여기에 항생제를 넣으면 항생제 고체 배지가 되는데 여기에 cell을 spreading하면 콜로니를 형성하게 된다. 이렇게 형성된 콜로니를 template로 pcr하여 원하는 유전자가 삽입된 것을 확인 하는 것을 콜로니 pcr이라고 한다. 형성된 콜로니를 pcr하기 위해서는 이쑤시개로 콜로니만 살짝 떠서 pcr tube에 넣으면 된다. 이 때 살짝만 떠서 해야 형성된 콜로니만 회수 할 수 있다. 콜로니 외의 그냥 항생제 고체 배지 위의 균을 뜨게 되면 이러한 균 또한 pcr로 증폭되어 원하는 유전자가 삽입된 vector를 얻을 수 없다. 이 후 pcr 방법은 다음과 같다.
Polymerase chain reaction으로 시험관에서 특정 DNA 절편을 증폭해 많은 양을 얻고자 할 때 수행한다.

참고 자료

없음