생명과학실험 레포트2 DEAE Sepharose anion exchange chromatography

목차

Ⅰ. 실험 일시
Ⅱ. 실험 목표
Ⅲ. 실험 목적
Ⅳ. 실험원리
Ⅴ. 실험 재료
Ⅵ. 실험 방법
Ⅶ. Discussion
Ⅷ. 참고문헌

본문내용

Ⅰ. 실험 일시
2013 / 3 / 20 (수) 3:30pm ~ 5:00pm

Ⅱ. 실험 목표
Column chromatography를 이용하여 Alkaline Phosphatase 를 분리한다.

Ⅲ. 실험 목적
첫째, Ion exchange chromatography의 원리를 이해한다.
둘째, Chromatography 실험 수행을 통해 실제로 원하는 물질을 분리해 낼 수 있다.

Ⅳ. 실험원리
● Column의 원리
Column은 [ 기둥, 표의 세로 열 ] 이라는 본래의 의미를 가지고 있다. 건축에서는 기둥의 의미로 쓰인다. 그러나 Chromatography 에서의 Column 이라고 함은 Chromatography 에서 혼합물질에 대한 분리의 장이 될 수 있는 상태를 가진 관을 뜻한다. Column은 대개 충전제 (Packing material) 를 채우거나 내벽에 고정상 액체를 코팅한 관을 지칭하는 경우가 일반적이지만, 내벽에 화학결합기를 도입하거나 흡착 Chromatography 용으로 부식시킨 관도 포함된다. Column의 재질로 구별하면 구리제, 스테인리스제, 유리제 또는 합성 수지제가 있으며, Column의 모양은 나선형, V자형, 직선형 등이 있다.
Column은 Liquid chromatography에 많이 쓰이는 Packed column과 Gas chromatography에 많이 쓰이는 open tubular column이 있다. Packed column은 입자에 정지상이 코팅되어 있는 것이고, open tubular column은 모세관에 정지상이 코팅되어 있다.
본 실험인 ion exchange chromatography에서 사용되는 column은 아래의 그림과 같이 직선형의 Column이 쓰인다. Column은 사용되지 않은 상태에서는 관의 좁은 입구 부분이 막혀져 있고 사용시에는 입구를 개봉하여 사용한다. Column 입구에는 glass wool이 존재하여 충전제가 Column 외부로 유출되는 것을 막는 역할을 한다.
Column에 분리하고자 하는 액체 혼합물을 주입하면 액체 혼합물은 중력에 의해서 Column 내부를 흘러내려가게 된다.

참고 자료

Chromatography & Column – 식품 분석학 / 노봉수 · 김석중 · 김영석 · 이광근 · 이재환 / 수학사 / 2008년 / p. 358 ~ 384
Column – Wikipedia 검색 / http://en.wikipedia.org/wiki/coumn
Column 그림의 출처 – http://www.chemguide.co.uk/analysis/chromatography/column.html
Chromatography 그림의 출처 – http://www.transparencymarketresearch.com/chromatography-market.html