[실험프로토콜] CCK를 이용한 Cell viability 측정

소개글

CCK를 이용하여 viability를 측정하는 방법입니다.
파워포인트를 이용하여 그림으로 간단하지만 자세히 설명되어 있습니다.
흡광도는 Softmax pro 5.4f으로 측정하였는데, 그 프로그램에 대한 설명 또한 자세히 나타냈습니다.

목차

1. Materials
2. Method
3. Media Suction
4. Method 1. [96well Method]
5. Method 2. [24well Method]
6. Next day

본문내용

Materials - 100Φ dish에 있는 cell - New Media (FBS+/ PS+) - 1XPBS - Trypsin (+Phenol red)
- Trypan blue stain (0.4%)
- CCK-8 solution
- 24well
- 96well - 15ml Conical tube - 50ml Conical tube (media & 1XPBS 분주해 두는 용) - cell counting slide - Aid / Aid tip (10ml) - Pipette / pipette tip - Clean bench - Microscopy - Centrifuge (15ml conical tube 용) - Suction기기
- CO2 incubator
- Cell counter
- microplate reader - Excel : microsoft office excel - Softmax pro : Softmax pro 5.4

Method (English) / 96well 1. Inoculate cell suspension (100ul/well) in a 96-well plate. Pre-incubate the plate in a humidified incubator (e.g., at 37℃, 5% CO2 ). 2. Add 10ul of the CCK-8 solution to each well of the plate. - Be careful not to introduce bubbles to the wells, since they interfere with the O.D reading. 3. Incubate the plate for 1-4hours in the incubator. 4. Measure the absorbance at 450nm using a microplate reader.

참고 자료

없음