(연세대 일반생물) transformation
- 최초 등록일
- 2016.11.08
- 최종 저작일
- 2016.11
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소개글
연세대 일반생물2 A+ 받은 레포트입니다.
목차
1. 이론
2. 실험결과
3. 결과분석
4. 토의 및 건의사항
5. 참고문헌
본문내용
Discussion
이번 실험은 대장균에 앰피실린 저항 유전자와 특정 DNA가 삽입된 plasmid를 주입하고, 앰피실린 배지에 길러, 잘 재조합된 박테리아를 선별하는 실험이었다.
이번 실험은 성공적이었지만, 콜로니가 잘 생성되지 않았다면 그 요인으로 두가지를 생각해 볼 수 있을 것이다.
첫째로, DH5a cell에 DNA를 삽입시키는 과정에서 충격을 가하는 실수를 하는 경우이다.
우리는 이 과정을 조심스럽게 진행하였는데, 이는 competent cell이 되어 약해진 cell에 충격을 주어 cell death를 유발하거나, cell membrane의 conformation에 변형을 주지 않기 위함이었다고 생각된다.
Heat shock시 튜브를 흔들지 않게 한 것도 conformation이 유동적으로 변형된 membrane에 DNA가 삽입되는데 방해되는 요인을 통제하기 위함이었다.
만약 충격이 가해졌다면, ampicillin내성 플라스미드가 삽입되지 않은 대장균 수가 많아지기 때문에 매우 적은양의 colony만 관찰되었을 것이다.
참고 자료
Cambell Biology, 9th edition, Reece,Urry,Cain, 20장 유전학, 398~400pg
http://blog.naver.com/kangyu718?Redirect=Log&logNo=40194699798 competent cell 만드는 원리
http://blog.naver.com/nardlove?Redirect=Log&logNo=110162747448 ampicillin, kanamycin 화학 구조 사진