Bradford법을 통한 단백질 정량 분석

목차

1. 서론

2. 실험
1) 실험 전 준비
2) 표준용액의 제조
3) 흡광도 측정

3. 결과
1) 흡광도 측정 및 표준곡선 만들기
2) 표준용액과 값 비교

4. 결론 및 고찰

5. 참고문헌

본문내용

Bradford법에 의한 단백질 정량은 Coomassie Brilliant Blue G-250이 단백질과 결합하면 최대 흡광 파장이 465 nm에서 595 nm로 변한다는 원리를 이용한다. Coomassie Brilliant Blue G-250은 pH에 따라 두 가지 형태로 존재하는데, 산성용액에서 양전하를 가지는 dye는 465 nm의 빛을 흡수한다. 그러나 단백질과 결합하여 음전하를 가지게 되면 dye는 595 nm의 빛을 흡수한다. 이 방법의 단점은 arginine기에 특이적으로 반응한다는 사실이다. 단백질마다 arginine기의 함량이 틀리므로 오차를 유발할 수 있다. 흡광도와 단백질 양이 비례하므로 단백질의 정량 분석이 가능하다.

<중 략>

x값은 결국 단백질 농도가 되므로 미지시료1에 포함된 단백질 농도는 132.67μg/mg 정도 이고 미지시료2의 단백질 농도는 552.67μg/mg 정도 이다.

참고 자료

Wikipedia bradford 단백질 정량법"4.5. Determination of protein concentration". elte.prompt.hu. Retrieved 2016-05-19.
Ninfa, Alexander J. (2010). Fundamental Laboratory Approaches for Biochemistry and Biotechnology. Wiley. pp. 117–118. ISBN 978-0470087664.