DNA cloning (Ligation) Restriction analysis of plasmid DNA

*영*

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DNA cloning이란 DNA를 자르거나 잇는 등의 조작을 거쳐 세포에 도입하고 복제함으로써, DNA 단편을 증폭하여 얻는 조작이다. 구체적으로 DNA 분자 하나가 하나의 숙주세포 안으로 들어가도록 하는 유전자 도입과정을 거쳐 특정 DNA를 포함하는 숙주세포의 집합체를 선별하게 되는데 이 집합체를 클론이라 하고, 이런 클론을 얻는 과정을 클로닝이라고 한다. 이 클론은 DNA 분자의 사본을 많이 갖게 되므로, 이것을 분리하여 특정 유전자를 확보할 수 있다. 즉, 특정 유전자를 지닌 대장균을 배양하여 클로닝하면 아울러 유전자를 클로닝할 수 있게 되는 것이다. 유전자 클로닝 실험의 기본적인 단계는 다음과 같다.

<중 략>

(1) 클론되어질 유전자를 포함하고 있는 DNA 단편이 재조합 DNA 분자를 생산하기 위해 벡터라는 원형 DNA 분자 속으로 삽입된다.
(2) 벡터는 유전자를 숙주세포로 운반하는 역할을 하며, 숙주세포로는 여러 형태의 세포가 있으며, 그 중에 박테리아가 일반적으로 사용된다.

참고 자료

남상욱, 권혁빈, 최선심, 유전공학의 이해, 라이프 사이언스, p54-55, p108
Charalampos Aslanidis and Pieter J. de Jong, Ligation-independent cloning of PCR products (LIC-PCR) Nucl. Acids Res. (1990) 18 (20): 6069-6074.
이병무, 유전자 클로닝과 DNA분석, 월드사이언스, p5

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