단백질 정량법 예비

목차

1. 실험제목
2. 이름
3. 실험목적
4. 실험원리
5. 시약 및 기구
6. 실험방법

본문내용

Ⅰ) 실험의 필요성 및 개요
단백질 정량법에 있어서 핵심은 활성과 농도이다. 단백질의 정량법은 단백질의 농도를 절대적으로 측정하는 방법으로 여러 가지가 있다. 대표적인 방법으로 UV, Lowry, BCA, Bradford, dye-binding assay등이 있다. Sensitivity, 간편성, 단백질 종류, 단백질과 함께 존재하는 inhibitor의 유무 및 허용 농도, pH 등을 기반으로 하는 적절한 방법을 선택하여야 한다. 단백질의 정량 방법의 선택에 있어서 inhibitor는 주요 요소이다.
특히, 단독적인 허용농도는 이미 알려져 있지만, 여러 가지가 조합하여 발생하는 문제점은 희석(dilution)을 하거나 다른 측정법을 사용해서 해결해야 한다. 단백질의 정량을 위해 측정법을 선택했다면 표준물질, 완충 용액(blank), 목적 단백질 용액을 차례로 측정하여 standard curve (표준 곡선)으로부터 단백질 농도를 산출해낸다. 표준물질로는 bovine serum albumin(BSA)가 널리 쓰이며, 한 번 측정한 값을 지속적으로 사용하지 않고, 매 실험마다 측정해야 한다.

Ⅱ) 단백질 정량이란?
단백질 정량이란 sample 내에 포함된 단백질의 양, 또는 농도를 구하는 과정으로써, 대부분의 생명과학실험의 기본이 되는 과정이라고 할 수 있다. 생물학 분야의 경우 다른 분야보다 결과를 볼 때까지 뭔가 잘못되었다는 것을 알기 어려워, 준비 단계에서의 단백질 정량이 잘 못 이루어지면 헛수고를 하거나 잘못된 결과를 얻을 수 있다. 이러한 이유 때문에, 단백질 정량을 정확하게 하는 것은 매우 중요하다. 또한, 정확성 뿐 만 아니라, 대부분의 실험에서 반복적으로 사용하게 되므로, 간편성 역시 중요하게 여겨지지 때문에, 실험에 따라서 다양한 단백질 정량 방법이 사용되고 있다. ☞ 단백질 정량법에는 크게 Clolorimetric 방법과 Eectrophoresis 방법이 있는데, 대부분 Colorimetric(비색법) 방법을 사용한다.

참고 자료

없음