[바이오공학실험]RNA extraction from cells

소개글

RNA extraction from cells 에 관한 실험레포트입니다.

목차

1. 실험 목적
2. 실험 배경 및 원리
3. 실험 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 주의 사항
6. 실험 결과
7. 토의 사항
8. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적
가. 세포에서 RNA를 추출해본다.
나. RNA를 추출해보고 분광광도계를 이용해 실험으로 얻은 RNA와 DNA를 정량분석한다.

2. 실험 배경 및 원리
가. RNA extraction
1) RNA extraction의 일반사항
① RNA extraction은 유전자 발현의 양상과 메커니즘 연구(노던블롯분석, RNase보호분석, RT-PCR과 cDNA제작 및 in vitro번역 실험)에 있어 필수적인 과정이다.
② RNA extraction은 세포의 분쇄, 단백질의 분해와 제거, RNA농축과 양과 질 검정의 단계를 갖는다.
③ 세포내에 존재하는 RNA는 rRNA = 80∼85%, tRNA, miRNA, snRNA = 15∼20%, mRNA = 1∼3% 의 비율로 존재한다.
2) RNA분리 원칙
① Rnase로부터 RNA를 보호
② 세포가 파괴되면서 나오는 endogenous RNase 방지
③ 단백질제거 (Phonol/chloroform의 처리)
④ DNA로부터 선택적으로 RNA를 분리

참고 자료

Biochemistry 8th ed. Jeremy M. Berg, Lubert Stryer
RNA Purification and Analysis - Sample Preparation Extraction Chromatography, Douglas T. Gjerde, Lee Hoang, and David Hornby