Gene cloning and vector - Mini-preparation of plasmid DNA 와 gel electrophoresis.
- 최초 등록일
- 2017.10.15
- 최종 저작일
- 2015.03
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소개글
Gene cloning and vector - Mini-preparation of plasmid DNA 와 gel electrophoresis 레포트 입니다.
결과에 대한 사진이 첨부되어 있고, 실험의 기본 내용에 대한 정리 있습니다.
목차
1. Topic
2. Aim
3. Background
4. Materials & Methods
5. Results
6. Discussion
7. Reference
본문내용
1. Topic
Mini-preparation of plasmid DNA 와 gel electrophoresis.
2. Aim
Mini-prep solution kit 를 이용하여 plasmid DNA 를 추출하고, gel electrophoresis 을 진행한다.
이를 통해 mini-prep solution 과 gel electrophoresis 의 과정과 원리를 이해하고, 결과를 분석 및 논의한다.
3. Background
Mini-preparation 은 bacteria 로 부터 DNA 를 소량으로 추출한다는 의미로, 추출하는 방법은 여러가지가 있다. Alkaline lysis preparation, lithium-based procedure, 그리고 boiling method 가 있다고 한다. 이번 실험에서 사용한 것은 alkaline lysis procedure(Birnboim and Doly,1979)로 가장 일반적으로 분리하는데 쓰이고 있다. Lithium mini-preparation 은 bacterial cell 을 triton X- 100/LiCl 과 phenol/chloroform 을 처리하여 plasmid DNA 를 제외한 나머지 물질을 침전시키는 원리를 이용한다(1). 이 분리법은 가장 빠르게 plasmid DNA 를 분리할 수 있다.
참고 자료
Vladimir Liska and Ruth M.Ruprecht. Dana-Farber Cancer Institute and Harvard Medical School.<Rapid Minipreparation of Plasmid DNA for Screening Multiple Colonies>,1999. Biotechniques, 26: pp.66-68.
Baigen Mei, Allen D. Budde, and Sally A. Leong. < sid1, a gene initiating siderophore biosynthesis in Ustilago maydis : Molecular characterization, regulation by iron, and role in phytopathogenicity>.1993. Proc.Natl.Acad.Sci.USA. Vol.90, pp.903 ~907.
1kb DNA-ladder information. Material 20150323.ppt.
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Robert B. Helling, Howard M. Goodman, and Herbert W. Boyer. <Analysis of Endonuclease R.EcoR1 Fragments of DNA from Lambdoid Bacteriophages and Other Viruses by Agarose-Gel Electrophoresis>.1974.Journal of Virology. pp.1235~1244.