[분자유전학실험] RFLP(restriction fragment length polymorphism)

목차

1. Purpose
2. material
3. introduction
4. Method
5. Result
6. Discussion
7. Reference

본문내용

3. Purpose : 유전적으로 서로 다른 개체를 비교 분석하려면 유전적 다형형상(polymorphism)이 필요하다. 제한-단편-길이-다형형상 분석법이라고 불리는 RFLP방법으로 특정제한 효소로 유전자를 절단했을 때 서로 다른 길이의 DNA-단편이 생성됨을 관찰함과 동시에, 이를 비교 분석 해보자.

4. Materials : Plasmid DNA, 제한효소(HindⅢ, HinfⅠ), 10X Buffer, 멸균증류수(D.W), 1% 아가로오즈 젤, 전기영동 KIT, TAE Buffer, 1kb DNA ladder, 파이펫, 팁, Eppen tube(E-tube), 항온수조(37℃), Trans-illuminator.

5. Introduction :
RFLP(restriction fragment length polymorphism, 제한 효소 절편 길이 다형성)란 1980년 데이비드 보스테인(David Bostein)과 그의 동료들이 제한효소(restriction endonuclease)로 가계지도를 작성하던 중 처음 발견된 방법으로 각 개인으로부터 얻은 DNA를 적당한 제한효소로 자르고 전기영동을 한 후 특정 탐침으로 Southern 혼성화할 때 나타나는 절편 크기의 유전적 다형성을 뜻한다. 그들은 DNA상의 특정 부위에 점 돌연변이(point mutation)가 생겨 제한효소로 절단하였을 때 나타나는 절편들의 길이가 개인마다 다양하게 나타나는 현상을 관찰하였다. DNA 서열에 돌연변이가 일어나면 새로운 제한효소 인식서열이 생길 수도 있고, 반대로 기존 제한효소 인식서열이 없어질 수도 있다. 예를 들어 sickle-cell anemia가 있는 사람의 β-globin 유전자는 정상인의 β-globin 유전자에 존재하는 제한효소 Dde I의 절단부위에 치환 점돌연변이가 일어나 이 제한효소로 절단되지 않기 때문에 이 부위의 좌우에 존재하는 두 절편이 붙어 1개의 커다란 절편을 이룬다.

참고 자료

http://www.encyber.com/search_w/ctdetail.php?masterno=709429&contentno=709429
http://blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=mua6738&logNo=150035632151
http://cms.daegu.ac.kr/sgpark/life&chemistry/%EC%9C%A0%EC%A0%84%EA%B3%B5%ED%95%99.htm
http://dasan.sejong.ac.kr/~yjlee/p-restriction%20enzyme.htm
http://biopedia.org/index.php/%EC%A0%9C%ED%95%9C%ED%9A%A8%EC%86%8C_(restriction_enzyme)
http://www.worldlingo.com/ma/enwiki/ko/HindIII
http://cms.daegu.ac.kr/sgpark/life&chemistry/%EC%9C%A0%EC%A0%84%EA%B3%B5%ED%95%99.htm
http://beamsbio.co.kr/product/index.php?mode=product_info&item=127
http://webbuild.knu.ac.kr/~app-mic/resources/lecture/functional%20biotechnology/chap8-DNA%20manipulation.pdf
http://www.encyber.com/search_w/ctdetail.php?masterno=828834&contentno=828834
http://www.seropia.com/bt/20304.html
http://www.seropia.com/15/15.html
http://www.envitop.co.kr/06chumdan/05/sp1.htm