Westernblot Cell harvest&Sampling

목차

1) 서론
2) 재료 및 방법
3) 결과
4) 고찰

본문내용

(1) 배경지식 및 이론
Western blot을 하기 위해선 그 전에 미리 준비해야할 과정들이 존재한다. Western blot은 단백질의 발현양을 측정하는 방법으로 세포 내에 존재하는 단백질양을 측정한다. 그러나 세포내에 단백질들은 3,4차 구조로 존재하여 실제 분자의 무게와는 다르게 측정 될 수 있기 때문에 1차구조인 linear 구조로 풀어줘야 한다. 따라서 비공유결합인 소수성결합, 수소결합, 정전기적 인력, 이황화결합 등을 모두 풀어줘야 한다. 이때 이러한 비공유결합을 분해하기 위해선 SDS라는 detergent와 heat 그리고 DTT(dithiothrenol)등을 이용해 분해를 시켜준다. 이렇게 얻어낸 단백질의 농도를 측정하기 위해선 BCA method를 진행한다. 이것은 단백질 용액에 Cu2+이온을 반응시킨 후, BCA가 Trp, Tyr, Cys의 도움으로 Cu+ 이온과 복합체를 형성하여 자색으로 발색하는 반응을 이용한 방법이다

참고 자료

없음