[A+ 연세대] 일반생물학 및 실험 - 플라스미드 DNA 분리 (miniprep)
- 최초 등록일
- 2017.12.23
- 최종 저작일
- 2017.12
- 3페이지/ 한컴오피스
- 가격 1,500원
* 본 문서는 한글 2005 이상 버전에서 작성된 문서입니다.
한글 2002 이하 프로그램에서는 열어볼 수 없으니, 한글 뷰어프로그램(한글 2005 이상)을 설치하신 후 확인해주시기 바랍니다.
목차
1. 실험 목적
2. 실험 결과
3. 논의할 점
4. 추가 연구
5. 참고 문헌
본문내용
1. 실험 목적
대장균이 가지고 있는 핵산 중에서 원형 고리 유전물질인 DNA 플라스미드를 분리해내는 원리와 방법을 익히고, 일련의 유전자 재조합 과정에서 목적 플라스미드를 정제하는 핵심 기술임을 인지하여 그 목적에 따른 활용 방안을 모색한다.
2. 실험 결과
다양한 종류의 플라스미드 정제 방법 중에서 SDS를 이용한 알칼리용해를 이용한다. 아래 표와 같은 성분의 세 종류의 용액 Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ을 준비한다.
대장균 세포를 추출하여 준비한 이후 용액Ⅰ과 용액Ⅱ를 대장균 침전물에 차례로 주입한다. 이때 용액Ⅰ을 주입한 이후에는 기기를 이용하여 충분히 섞는다. 용액Ⅲ을 뒤이어 주입하면 침전물이 생기기 시작하는데 10분 동안 12,000rpm으로 원심분리하고 일련의 정제과정을 거쳐 얻어진 DNA를 전기 영동한다.
참고 자료
Tolmasky, Marcelo, Alonso, Juan Calos (2015), Plasmids: Biology and Impact in Biotech-
-nology and Discovery, Washington DC, 110∼120p
Carson, Sue (2012), Molecular Biology Techniques : A Classroom Labatory Manual, Academic press, 29∼30p
Seunggu Leu (1983), Transformation of Escherichia coli by Plasmid DNA, Yonsei university, 151p
http://www.angelfire.com, ‘Cellular and Molecular Biology Topics: DNA and RNA’ post
Campbell, Biology A Global Approach, Pearson, 10th Edition, 610p