[식품미생물학 및 실험 보고서] 대장균군 정성 시험과 효모의 당류 발효성

목차

1. 실험 일자
2. 실험 원리 및 배경
3. 재료 및 기구
4. 실험방법
5. 결과 및 고찰

본문내용

실험 원리 및 배경
이번 실험에서는 대장균군 정성 시험과 효모의 당류 발효성을 진행했다. 대장균군의 존재여부를 검사하는 정성 시험을 통하여 대장균군이 Phenol red 지시약을 함유한 액체배지의 색을 어떻게 변화시키는지 관찰했다. 또한 발효관을 이용하는 Durham tube방법을 이용ㅇ하여 당 발효시 생성되는 gas를 포집하고, 대장균군과 마찬가지로 Phenol red 지시약을 사용하여 산의 생성여부를 판단해 보았다.

우선 대장균군은 Gram음성, 무아포성 간균으로서 유당을 분해하여 가스를 발생하는 모든 호기성 또는 통성 혐기성세균을 말한다. 대장균군 시험에는 대장균군의 유무를 검사하는 정성시험과 대장균군의 수를 산출하는 정량시험이 있다.
이번 실험에서는 대장균군의 유무를 검사하는 정성시험을 진행했다. 대장균군 정성시험에는 유당배지법, BGLB 배지법, 데스옥시콜레이트 유당한천 배지법이 존재한다.

첫 번째로, 유당배지를 이용한 대장균군 정성시험은 추정시험, 확정시험, 완전시험 3단계로 나눈다. 3.3 제조법에 따른 시험용액 10 mL를 2배 농도의 유당배지(배지 2)에, 시험용액 1 mL 및 0.1 mL를 유당배지(배지 2)에 각각 3개 이상씩 가한다.
- 시험용액을 접종한 유당배지(배지 2)를 35～37℃에서 24±2시간 배양한 후 발효관내에 가스가 발생하면 추정시험 양성이다. 24±2시간 내에 가스가 발생하지 아니하였을 때에 배양을 계속하여 48±3시간까지 관찰한다. 이때까지 가스가 발생하지 않았을 때에는 추정시험 음성이고 가스발생이 있을 때에는 추정시험 양성이며 다음의 확정시험을 실시한다.
- 추정시험에서 가스 발생한 유당배지발효관으로부터 BGLB 배지(배지 3)에 접종하여 35~37℃에서 24±2시간 동안 배양한 후 가스발생 여부를 확인하고 가스가 발생하지 아니하였을 때에는 배양을 계속하여 48±3시간까지 관찰한다. 가스발생을 보인 BGLB 배지(배지 3)로부터 Endo 한천배지(배지 5) 또는 EMB 한천배지(배지 6)에 분리 배양한다.

참고 자료

식품의약품안전처, “3.7.1 정성시험”, https://www.foodsafetykorea.go.kr/foodcode/01_03.jsp?idx=368
박신인·남은숙, 『식품 미생물학 실험서』, 도서출판 효일, 2012, 148-150쪽
나무위키, “페놀 레드”, https://namu.wiki/w/%ED%8E%98%EB%86%80%20%EB%A0%88%EB%93%9C