유과학및실습 그람염색 실험 레포트

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본문내용

- 실습목표
미생물은 눈으로 볼 수 없는 종이 대부분인데, 그들은 현미경을 통해서 관찰 할 수 있다. 이 때, 현미경을 통한 관찰에서 그 미생물을 좀 더 정확하게 관찰하기 위해 또는 그 미생물의 종류를 구분하기 위해 ‘염색’ 을 실시하게 되는데, 이로 인해 미생물에 색이 입혀져 보다 가시적으로 볼 수 있게 된다. 이번 실험에서는 세균의 동정, 분류의 중요한 지표인 그람 양성균과 음성균을 구분하고 동시에 분별염색의 원리와 조작법을 습득한다.

- 실습 재료 및 기구
균주, 광학 현미경, 슬라이드글라스, 커버글라스, 필터페이퍼, 백금이, 알코올램프, 크리스탈바이올렛 용액, 그람요오드 용액, 95% 에탄올, 사프라닌용액, 스퀴즈바틀, 장갑, 폐수통, 이멀전 오일

- 안전 및 유의사항
1. 슬라이드 글라스에 균주를 도말할 때 균의 양을 너무 과하지 않게 한다. 균이 너무 많으면 균이 뭉쳐서 현미경으로 관찰이 힘들다.
2. 커버글라스 씌울 때 기포가 생기지 않게 한다. 표차가 생겨 관찰이 힘들다.
3. 염색법은 기술이 미숙하면 잘못 판정하기 쉬우므로 숙련될 때까지 많은 연습이 필요하다.
4. 어린 배양균은 염색성이 좋으나 노쇠기 배양균은 염색성이 좋지 않아 그람 양성균이 음성균 같이 보일 때가 많으므로 주의하여야 한다.

- 실습순서

배지 제조 원리
그람양성균은 염색한 세균을 알코올 같은 탈색제로 탈색하여도 크리스탈 바이올렛 또는 메틸 바이올렛-요오드 복합물이 세포 속에 그대로 머물러 있게 된다. 그 반대로 그람 음성균은 염색한 후 알코올에 의하여 완전히 탈색된다. 색소-요오드 복합물을 탈색액으로 처리했을 때 그대로 균 체 안에 머물러 있게 하는 것은 세포벽의 역할이다.

그람염색 실험방법
1. 슬라이드 글라스를 알코올로 깨끗이 닦아 지방을 제거한다.
2. 슬라이드 글라스 위에 멸균 생리식염수 한 방울을 떨어뜨린다.
3. 한천 배지에서 18-24 시간 배양한 균을 백금루프로 소량 따서 슬라이드 글라스 위의 생리 식염수에 잘 푼다.
4. 공기 중에..

<중 략>

참고 자료

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