생명공학실험. 순수분리streaking, 연속희석, API 20NE ZYM test

목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Materials
4. Methods
5. Results
6. Discussion

본문내용

Abstract
Complex medium중 하나인 LB배지를 이용하여 순수분리 하는 실험을 하였다. Streaking을 이용해 Agar plate위에 점차적으로 희석시켜, 오염되지 않은 single colony를 관찰하였다. 또한 미생물의 밀도를 측정하기 위해, 연속희석법을 이용하여 10-6까지 희석 후 콜로니의 수를 측정해 생균수를 계산하였다. 하지만 10-6까지 희석하였지만 콜로니 수가 300을 초과하였다. 더 희석할 필요가 있었지만, 위의 자료를 이용하여 시료의 밀도를 구했다. 다음 실험은 API20NE이다. API20NE은 미지의 non-Enterobacteriaceae를 동정하는 실험이지만 특정 미생물을 이용하여 결과를 확인하였다. 또한 API ZYM을 이용하여 특정 미생물의 효소활성(효소의 존재여부)을 확인하였다,

Introduction
① Luria-Bertani media : LB배지는 미생물 배양에 가장 일반적으로 쓰이는 배지로써 Luria-Bertani media의 준말이다. Agar의 유무에 따라 Liquid media 와 Solid media로 나뉜다. 보통 liquid media는 많은 양의 cell을 얻기 위하여 & solid media는 single colony를 얻기 위해 사용한다. 이번 실험은 순수분리를 하기위한 실험이므로 고체 배지인 LB Agar Plate를 사용하였다. LB배지 성분은 다음과 같다.
1.0%(w/v)Tryptone : 필수aa/ 0.5%Yeast extract : 비타민,금속이온/ 0.5%Nacl : Na+이온제공
추가) Complex medium : 뷔페 느낌의 배지이다. 천연재료를 혼합하여, 미생물의 증식에 충분한 영양소를 함유하고 있어 제조하기 쉽다. 정확한 구성은 알 수 없다. 어쩌구 extract가 포함되면 그 배지는 복합배지. 이번 실험에 사용한 LB배지는 복합배지이다.

참고 자료

Madian et al, 오계현, 『핵심미생물학』, 바이오사이언스출판, 2013, p 41~50/ 122~123/
SAGEr, R. and S. GRANICK. 1954.Nutritional control. J.Gen. Physiol. 37:729-742.