실험4 결과레포트 Lowry protein assay (단백질 정량 분석)

목차

1. Abstract
2. Experiment
3. Result & Discussion
4. Conclusion
5. Reference

본문내용

이번 실험은 다양한 당백질 정량 분석 방법에 대해 이해하고 그 중 Lowry method를 이용하여 UV/Vis spectrophotometer를 통해 단백질 용액의 흡광도를 측정하고 미지의 단백질 시료의 농도를 정량 분석해보는 실험이였다. 먼저 BSA 용액을 다양한 파장대에서 측정한 결과 750nm에서 가장 큰 흡광도를 나타내 최적의 파장대로 설정했다. 그 후에 최적의 파장대인 750nm에서 BSA 농도별 흡광도를 Standard curve로 나타내 미지의 단백질 흡광도를 Standard curve 함수에 대입해 농도를 알아낼 수 있었다.

실험을 하기 전에 먼저 필요한 시약들을 제조하는 것부터 시작하였다. 실험노트에 쓰여 있던 Lowry Reagent와 Protein standard 시약은 Lowry protein assay kit로 되어 있어서 따로 제조하지 않아도 된다고 하셔서 우리는 Folin&Ciocalteu’s Phenol reagent를 1/2 비율로 증류수에 희석하는 것만 하였다. Folin&Ciocalteu’s Phenol reagent를 1ml,증류수를 1ml씩 넣어 마이크로 피펫으로 플라스틱 튜브에 넣어 제조하였다.

1. 증류수로 1ml의 BSA 원액(2)을 희석하여 200, 150, 100, 50 의 BSA 샘플을 제조하기에 앞서 우리는 어떻게 하면 효율적으로 희석을 할 수 있을까 생각했다.
그 결과 200의 농도부터 50까지의 농도까지 순서대로 증류수만 넣어 희석 하는 것이 가장 효율적이라고 생각해서 미리 추가할 증류수의 양을 계산해두었다.
먼저 1ml의 BSA용액(2)을 증류수 9mL를 넣어 200의 BSA샘플을 만들었다.

참고 자료

실험 4 예비레포트
화공기초이론 및 실험2, 실험노트, 5p~6p
네이버 블로그, 통계학과 사색의 공간, 표준편차와 표준오차의 차이