식중독세균 동정실험 : 유전학적 동정법

목차

1. Introduction

2. Objectives

3. Materials and methods
1) Materials
2) Methods

4. Results

5. Discussion and conclusion

6. References

7. 과제

본문내용

1. Introduction
중합효소연쇄반응(Polymerase Chain Reaction, PCR)은 DNA의 원하는 부분을 복제,증폭시키는 분자 생물학적 기술이다.미량인 DNA용액에서 연구자가 원하는 검출하고자하는 특정 DNA단편만을 선택적으로 증폭 시킬 수 있는 기술이며,전자동기계를 사용하여 실험과정이 단순하고 증폭에 필요한 시간이 짧아 분자생물학,생물 분류 등 다양한 분야에서 활용되고 있다.처음에는 대장균에서 분리한 DNA 중합효소를 사용하였으므로 사이클이 지날때마다 효소를 첨가해야 하는 불편함이 있었지만 Taq DNA 중합효소의 발견이후에는 그런 불편함이 사라져 보편적으로 사용되게 되었다.본 실험에서는 PCR을 이용하여 미지의 시료에서 E. coli 동정을 위한 실험을 실습하고자 한다.

2.Objectives.
① 식중독세균의 분자유전학적 동정법 PCR의 기본원리를 이해한다.
② 장출혈성대장균의 16S rRNA와 병원성인자를 이용하여 동정하는 실험법을 실습한다.

3. Materials and methods
(1) Materials
- 시료 :A, B, C, D
- 기구 :Pipette 1000P, 100P, 200P, 10P, 멸균 Pipett tip, 멸균 EP tube
- 시약 :멸균 3차증류수, Taq polymerase, PCR buffer, dNTP, primer mixture, agarose, 1X TAE buffer, DNA ladder, RedSafe(Nucleic Acid Staining Solution)
- 기기 : Water bath, PCR machine, 전기영동기 Gel-Doc기기
- 기타 : 실험복, 라텍스장갑, 휴지, 네임펜, 100% 알코올 분무기

참고 자료

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전기영동.위키피디아. 2017. Available at:
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