[A+]연세대 생화학실험 anthrone test
- 최초 등록일
- 2019.03.31
- 최종 저작일
- 2018.04
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목차
1. Introduction
1) 실험목적
2) 실험원리
3) 배경지식
2. Material & Method
1) 실험재료
2) 실험방법
3. Result
1) 측정 Optical Density값과 Standard Curve
4. Discussion
1) 황산용액 묽히기
2) 결과분석
5. Reference
본문내용
실험목적
농도가 다른 glucose 표준용액에 anthrone 시약을 첨가한 뒤, 흡광도를 측정하여 표준곡선을 그 리고, 해당 식을 통해 optical density를 비교해 본다. 이를 통해 sample glucose의 농도를 추정 해 본다.
실험원리
진한 H2SO4에 의하여 고분자의 당이 단당류로 가수분해가 되면서 탈수반응을 일으켜 furfural 혹은 유도체가 되며, 그 유도체가 anthrone 과 반응하여 청녹색의 착색물질을 만든다. 당류의 농 도에 따라 탈수반응을 일으켜 furfural 유도체가 되는 정도가 다르기 때문에, 생성되는 청녹색의 착색물질 양이 다르게 나타난다. 그러므로 흡광도를 측정하면, 당류의 비색정량이 가능하다. 이 반응은 매우 예민(2r - glucose/㎖)하며, 미량의 당을 가수분해 없이 단시간에 정확하게 측정할 수 있다는 장점이 있다. 당류 이외의 유기화합물에서는 갈색이 나타난다.
배경지식
1) 비색분석 물질의 색의 농도 또는 색조를 표준 물질의 그것과 육안으로 비교하여 정량하는 화학 분석을 말한다. 비색 정량이라고도 한다. 고체 또는 기체의 착색을 이용하기도 하지만, 용액을 이용하는 것이 가장 일반적이다. 표준 물질로서 보통 피검 물질과 같은 것을 시료 용액과 같도록 조작하여 발색 시킨 표준 색 용액을 이용하지만, 변색하기 쉬운 경우 등에는 인공의 대용 표준열이나 색유리 등의 고체 표준 시료가 사용된다.
① 시각법: 이 방법에는 표준열법, 복제법, 균형법, 묽힘법 등이 있고, 각각 특색을 갖고 있다 육안으로 색의 농도를 비교하기 때문에 분석의 정밀도는 낮지만 특별한 장치를 필요로 하지 않는 점(간단한 비색관, 비색계를 이용한다), 조작이 신속한 점, 미량 성분의 정량에 적합한 점에 의해 일상 분석에 널리 이용된다.
② 광전 비색 분석: 광전 비색계(필터형 광전 광도계)를 이용해 단색광에 가까운 광선을 용액 에 조사하여, 그 투과광의 강도를 측정해서 정량하는 방법을 말한다.
참고 자료
Mary K. Campbell, 『생화학 8판』, Life Science Pblishing Co (2015), p.459-485
최수규, 『식품분석학』, 지구문화사 (2006), p 422
“Furfural, Anthrone, 비색분석” 『화학대사전』, 세화 (2001)
농촌진흥청 국립식량과학원 “Anthrone test” http://www.nics.go.kr (2018.04.01)
2018 생화학실험 http://yscec.yonsei.ac.kr