단백질 추출 및 흡광도를 이용한 단백질 정량

소개글

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목차

1. 서론
2. 실험 목적
3. 실험 재료 및 방법
4. 실험 결과 및 고찰
5. 참고문헌

본문내용

세포에서 단백질을 추출하기 위해서는 우선 세포막을 용해시켜야 한다. 세포막을 파괴하는 방법은 크게 두가지가 있는데, 첫번째는 lysis buffer을 이용해 화학적으로 분해하는 것이고, 두번째는 물리적으로 부수는 것이다. Lysis buffer는 개방형 세포를 파괴할 때 사용되는 완충액으로 buffer, (용해물의 산도 및 삼투압을 조절하기 위한)염으로 이루어져 있으며, 여기에 다양한 종류의 세제가 첨가되기도 한다. Lysis buffer는 동물과 식물 조직 세포 모두에서 사용할 수 있다. 본 실험에서는 용해된 세포를 원심분리해 단백질을 추출한다. 원심분리는 원심력으로 액체 중의 고체입자 또는 액체 미립자를 분리하는 조작으로, 침강분리, 탈수, 여과 등 기계적 분리에 주로 사용된다. 세포를 원심분리 시키면 핵과 같이 비교적 무거운 물질은 침전하고 단백질 부유물 등 비교적 가벼운 물질은 상등액에 남는다.
단백질의 양을 측정하기 위해서는 단백질뿐만 아니라 시료 안에 포함되어 있는 다른 세포 소기관들도 고려해야 한다.

참고 자료

Biochemistry (7th Ed) by Campbell and Farrell
Ceirwyn S. James, 알기 쉬운 식품분석화학, 광문각, 2001년, 294p
Mary Johnson, 『Protein Quantitation』, labome, https://www.labome.com/method/Protein-Quantitation.html, 2012-02-29