동물세포 관찰 및 계수: hemocytometer를 통한 Human dermal fibroblast의 cell counting

목차

1. 실험목표
2. 실험원리
3. 실험기구 및 재료
4. 실험방법
5. 실험결과
6. 고찰 및 토의
7. 참고문헌

본문내용

실험목표
· 동물세포의 배지시약의 특성을 이해한다
· 세포 배양의 세포형태 특징 및 세포증식 관찰한다
· 동물세포 계수를 위한 micropipet and hemacytometer
· 사용하여 세포계수를 계산하고 세포배양 시 어떤 영향을 주는지 조사한다

실험원리
1) hemocytometer를 통한 세포 계수
Figure1. hemocytometer의 pattern
현미경으로 관찰하면 죽은 세포는 trypan blue로 염색이 돼서 푸른색을 띠고 살아있는 세포는 광원이 통과해서 빛이 나는 것처럼 관찰된다. 먼지 같은 입자는 세포와 비슷한 모양으로 관찰되나 빛이 나지 않으므로 계수하지 않도록 주의한다. hemocytometer의 선에 걸친 세포도 계수한다.
hemocytometer는 크게 9개의 square로 나누어 있다. 한 개의 square에서 10-4L가 들어간다. 그중 작은 사각형이 아닌 작은 정사각형으로 이루어진 4개의 귀퉁이의 square에서 cell의 수를 세고 평균을 계산한다.

참고 자료

Marlene Absher(1973), Hemocytometer Counting, Tissue Culture, Pages 395-397
Jared Verner(1985), Assessment of Counting Techniques, Current Ornithology, pp 247-302