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중부대학교 기기분석 A+ 자료입니다.

중부대14
최초 등록일
2019.06.04
최종 저작일
2018.10
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본문내용

위의 그림을 보면 신호의 기록은 왼쪽에서 오른쪽으로 이루어지므로, Column에서 먼저 빠져 나오는 물질의 신호가 크로마토그램에 왼쪽에 위치하게 되며 이 신호를 봉우리 닮았다고 Peak라고 하며 Peak가 나오는 시간을 머무름 시간이라고 한다.
머무름시간은 물질이 주입되어 Column까지 가는 시간, Column에 머무르는 시간, 그리고 Column에서 빠져나오는 순간부터 검출기에서 검출되는 시간의 합이다.
시료물질이 Column에 처음 도입될 때 Column 단면 전체에 걸쳐 고르고 얅게 도입 되어야하고 시료의 띠는 얇을수록 좋다. 즉, 시료 용액의 부피는 작을수록 좋다.
위의 그림을 보면 시료 물질이 Column을 통과하면서 확산이 일어나 띠는 조금씩 넓어지게 되며 이를 띠넓힘현상 이라고한다. 이런 띠넓힘현상은 Column에 머무르는 시간이 많을수록 증가할 수 밖에 없는데 띠넓힘 현상을 최소가 되도록 해야한다.
Column에서 분리되는 물질의 띠넓힘 현상으로 Peak는 정규분포 곡선 혹은 가우스 곡선의 형태를 띠게 된가. 즉, 속도가 너무 빠르거나 너무 느린 분자의 수는 적고 평균에 가까운 속도를 가진 분자의 수가 많은 현상이며, 좌우 대칭이고 폭이 좁으며 높이가 커야 좋은 Peak라고 할 수 있다.
Peak가 정규성을 벗어나면 컬럼에 의한 분리 과정이 비정상적으로 이루어 졌다고 판단하며 Peak 후반부가 끌리는 Tailing이나 Peak 전반부 기울가 작은 정반대의 Peak도 개선의 대상이 된다.
정규성을 띄어도 폭이 너무 넓고 높이가 낮은 Peak 또한 개선 대상이다.
시료의 띠는 얇을수록 좋지만 왜 넓어지는가?
시료(용리)띠는 보통 다음의 세 가지 과정 때문에 넓어진다고 생각할 수 있다.
소용돌이 확산 : 분리관에서 기체 흐름의 패턴에 의한 피크 폭 넓어짐을 나타낸다. 지지체 입자 크기의 분포가 고르지 못하여 또는 충진이 고르지 못하여 분리관이 균일하지 않으면 운반기체 흐름의 경로에 있어 길이가 달라지게 되고 결국 폭이 넓이진 Peak가 야기된다.

참고 자료

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중부대14
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