병원성 미생물검사 방법

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목차

1. 살모넬라 검사 방법
2. 황색포도상구균 검사 방법
3. 대장균 O157:H7 검사방법

본문내용

1. 살모넬라
1) 시험법
검체 25g 또는 25mL+peptone water 225mL
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35℃에서 18±2시간 증균배양
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배양액 0.1mL를 취하여 10mL의 Rappaport-Vassiliadis배지에 접종
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42℃에서 24±2시간 배양
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증균배양액을 MacConkey 한천배지(MacConkey Agar) 또는 Desoxycholate Citrate한천배지(Desoxycholate Citrate Agar) 또는 XLD한천배지(Xylose Lysine Desoxycholate Agar)에 접종
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35℃에서 24시간 배양
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의심집락(MacConkey한천배지: 회백색 또는 무색의 작은 집락, Desoxycholate Citrate한천배지: 무색 또는 옅은 분홍색 집락, XLD한천배지: 무색 또는 중심부가 검은색을 띠는 집락)을 각각 TSI사면배지(Triple Sugar Iron Agar)의 사면과 고층부에 접종
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의심되는 균주(TSI사면배지 상에서 사면부가 적색이고 가스 또는 황화수소 생성(균열확인) 균주)를 택하여 그람염색하여 그람음성, 간균임을 확인
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살모넬라 진단용혈청[다가혈청, Vi, A,B,C,D,E)]을 사용하여 응집반응 확인 ※ Tip - 살모넬라 속으로 의심되는 균주가 출현하면 슬라이드그라스를 약간 가온하여 왁스연필로 선을 잘 그리고 구획 안에 다가혈청(polyvalent), Vi혈청과 멸균생리식염수를 각각 놓은 다음, loop로 집락을 따서 멸균생리식염수 옆에 묻히고, loop로 멸균생리식염수와 잘 혼합하여 균덩어리를 풀어서 각각 혼합한다. 유리 양끝을 손가락 끝으로 잘 잡고, 앞뒤로 기울여 액이 흐르지 않을 정도로 혼합시키면서 응집반응을 관찰
- 다가혈청(polyvalent)에 응집반응이 일어났다면 A,B,C,D,E 중 어딘가에 응집이 일어날 수 있음을 의미하며, Vi혈청에서 응집되면 살모넬라 Vi로 추정
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미생물동정 실시(API 20E kit 또는 Vitek 등 이용)

참고 자료

없음