생명과학실험 - DNA Purification

소개글

연세대학교 미래캠퍼스 2019년 생명과학실험 레포트입니다.
본 내용은 2019년에 시행된 실험을 기준으로 작성되었기 때문에
절대적인 자료가 아니며, 오로지 참고용으로만 사용해주시기 바랍니다.
실험 Results 자료는 실험조교 및 상황에 따라 언제든지 달라질 수 있기 때문에
공백으로 남겨두었으며, 이에 유의하시고 차질없이 사용하시길 부탁드리겠습니다.

목차

1. Title
2. Date
3. Purpose
4. Introduction
5. Materials & Methods
6. Results
7. Discussion
8. Reference

본문내용

3. Object : E.coli 세포를 Buffer Solution 처리하여 cell lysis를 시켜 plasmid DNA를 분리 및 전기영동을 내려 본다.

4. Protocol
(1) bacteria cell들을 EP tube에 pellet으로 만들고, P1 buffer 250ul를 넣고 resuspension 시킨다.
(2) 250ul P2 buffer를 넣고 5~6번 inverting 시킨다.
※ Inverting : EP tube 내 용액들이 잘 섞이도록 위아래로 천천히 뒤집어 섞는 방법.
(3) 350ul P3 buffer를 넣고 5~6번 inverting 후, ice에서 5min 정도 냉각시킨다.
(4) 12000rpm으로 centrifuge(원심분리기)에서 10분간 centrifugation 시킨다.
(5) 새 column에 상층액만 따서 넣고 1분간 centrifugation 시킨다.

참고 자료

Kenneth Marson 외 3명 지음 / 2016 / 생명과학의 이해 / 바이오사이언스 / 1판 / p.363~369
한국분자생물학회 편 / 1997 / 분자생물학 / 아카데미 서적 / 1판 / p.15~20, p.397~399
James D.Watson 외 5명 지음 / 2007 / 왓슨 분자생물학 / 월드 사이언스 / 5판 / p.648~652