MTT Assay를 통한 세포 viability 측정

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"MTT Assay를 통한 세포 viability 측정"에 대한 내용입니다.

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실험 목표: 항암제의 암세포에 대한 독성평가를 위하여 대표적인 세포 생존성 측정 방법인 MTT assay의 원리를 이해하고 실험 방법을 배운다.

실험 이론:
① MTT assay
(1) MTT 시약을 이용하는 Tetrazolium assay는 노란색의 수용성 MTT tetrazolium을 세포에 처리하면, 살아있는(metabolism이 온전한) 세포의 미토콘드라이에 있는 탈수소효소에 의해 tetrazolium의 ring structure 끊어지면서 청자색을 띄는 비수용성 MTT formazan 결정으로 환원되는 원리를 이용한 것이다. MTT formazan 결정은 일반적으로 DMSO 와 같은 유기용매에 녹여 ELISA reader를 이용하여 흡광도를 측정하는데, 이 때 formazan dye의 흡광도는 540nm 부근이다. 이흡광도는 MTT가 살아있는 세포에 의해 환원되는 양을 나타내며, 각 well에 존재하는 세포 수와 비례한다. 살아있는 세포가 많을수록 MTT formazan이 많아지므로 dye의 흡광도가 높게 측정된다.

참고 자료

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3975359/
https://www.dolomite-microfluidics.com/news/how-to-make-plga-microparticles/

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