PEI실험 보고서

목차

Ⅰ 실험 목적

Ⅱ 사전 지식
1. Gene transfection
2. transfection
3. PEI
4. GFP-P65
5. FBS, DMEM, HEK-293 cell
6. 수용체
7. Plasmid

Ⅲ 실험 방법
1. 실험준비물
2. 실험과정

Ⅳ 실험 결과

Ⅴ 실험 고찰

Ⅵ 참고문헌

본문내용

Ⅰ. 실험 목적
생명과학연구에 알맞게 사전지식을 얻고 실험 한다. Transfection에 대해 이론적으로 이해 한다. Transfection에 사용되는 시약이나, 세포배지등의 특성을 안다. PEI를 이용하여 GFP-p65 DNA를 PEI transfection시킨 과정을 관찰한다. PEI transfection의 결과를 확인하고 우리가 이론적으로 배운 내용을 적용할 수 있다.

Ⅱ. 사전지식
Transfection
Transfection이란 trans 와 infection의 합성어로 일반적으로 동물세포에 외부 DNA또는 RNA를 넣는 과정이다. 바이러스나 박테리아를 운반자로 사용하여 세포에 DNA를 도입할수있다. Transfection에는 화학적 기법과 물리적 기법이 있는데 우리가 사용한 방법은 화학적 기법 중에도 양이온 중합체 (cationic polymer)를 사용한 기법 에서 PEI, polyethylenimine (폴리에틸에민)과 같은 양이온 중합체를 이용하여 음이온 물질인 DNA와 효율적으로 결합한다.

Gene transfection
DNA를 세포내에 주입하여 발현도되도록하는 것을 Gene을 transfection한다. 물리적, 화학적 충격을 주어 세포 내로 DNA를 주입하는것이다. 대표적으로 Chemical method, Physical method, Virus mediated method로 분류할 수 있는데 우리는 chemical 방법으로 한다. 화학적 방법들의 원리는 인산골격을 가지는 DNA가 (-) charge를 띄는 것을 이용하여 (+) charge를 가지는 Ca2+ 이나 PEI 같은 강한 (+) charge의 polymer 들이 (+)/(-) interaction으로 서로 붙게 되고 이러한 DNA를 세포가 endocytosis로 먹어 삼키게 되며 세포 내로 DNA가 유입하는 원리입니다.

참고 자료

https://blog.naver.com/raysi74/120210171113
https://blog.naver.com/biomaxinc/221008577835
https://www.labplus.co.kr/front/app/ftchev.do?seq=692
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=5751174&cid=61233&categoryId=61233
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https://prezi.com/zkmac-g7nsd4/dmemdulbecos-modified-eagles-media/
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https://en.m.wikipedia.org/wiki/NF-κB
https://blog.naver.com/rhsyd375/80179844304
http://m.blog.daum.net/gnocchi/3
https://en.m.wikipedia.org/wiki/HEK_293_cells
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https://prezi.com/omz9gzxcwymk/presentation/
고분자 나노복합체를 이용한 유전자 전달시스템/김원종/고분자과학과 기술 제19권2호 2008년4월
KF-kB조절을 통한 오매추출물의 항염효과 및 작용기작에 관한 연구/ 서원상외5명/ 2014.1.22
미국 국립 의학 도서관 국립 보건원/ LPS- 자극 된 NF-κB p65 동적 반응은 RAW 264.7 대 식세포에서 TNF 발현의 개시 및 IL-10 발현으로의 전이를 나타낸다./Hobbs S외 4명