세포생물학실험 실험노트

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목차

1. LB 배지 제조
2. Bacteria growth curve
3. competent cell 제조
4. transformation
5. 쥐 해부 실험과 골수세포 관찰
6. Apoptosis 유도 인한 DNA ladder 현상 관찰
7. RNA preparation 및 cDNA 합성
8. PCR 및 RT-PCR

본문내용

1. LB 배지 제조
가. 실험 목적
대장균을 배양하기 위해 생장 배지를 제조한다.
나. 이론
*LB 배지란? : 박테리아 생장에 주로 사용하며 액체 및 고체의 형태로 제조 가능한 배지이다. 배지의 주요 조성은 Tryptone, Yeast Extracts, NaCl로 이루어져 있으며 각 구성 요소의 특징은 다음과 같다.
- Tryptone : 펩타이드 및 펩톤 포함, 단백질과 아미노산을 제공한다.
- Yeast Extracts : 다양한 유기물 포함, 탄소원을 제공한다.
- NaCl : 삼투압을 조절하며 세포가 터지지 않도록 이온을 제공한다.
* Autoclave(습윤멸균기)
100도 이상의 높은 증기압을 활용하여 세균 내성 포자까지 멸균하는 장비이다. 작동 조건은 121도, 1.5atm, 15분이다
-주의사항
1) 휘발성 물질을 투입하지 않는다.
2) 압력이 떨어지기 전까지 개봉하지 않는다. > 기압계와 압력계를 확인하고 개봉한다.
3) 멸균할 액체는 액체 부피보다 큰 용기를 이용해 멸균하여야 한다.
4) 내부에 용액이 넘쳤을 경우 세척해야한다.
5) 수증기 발생을 위해 일정량 이상의 증류수를 채운다.
* 실험의 과정
- 매스실린더를 이용하여 DW 300mL를 500mL 병에 분주한다.
- LB 배지의 각 성분을 계량하여 순서대로 500mL 병에 추가한다. (Tryptone 4g, Yeast Extracts 2g, NaCl 2g)
- 병 덮개에 튀지 않게 조심스럽게 흔들어 잘 녹여준다.

참고 자료

없음